
用户提供整体实验方案,吉玛通过评估客户需求,围绕公司特色,结合现有平台及扩展平台,利用分子细胞生物学技术,提供真实试验数据,完成客户外包试验。
1 下游靶基因表达量的鉴定
常规出示的结果同样包括:RT-PCR、Western,如果涉及分泌蛋白,可以进行Elisa实验,客户可指定检测方法
2 稳定株筛选实验
在药物压力下筛选稳定表达细胞株,常规出示结果包括:RT-PCR、Western,客户可指定筛选及检测方法。实验过程:1.抗生素筛选浓度确定(致死曲线):2. 细胞接种:转染实验前天接种细胞。转染时细胞密度达到60%~80%;3. 细胞转染(脂质体)或侵染(慢病毒)4. 利用质粒抗性筛选稳定干扰细胞株;5. 目的基因干扰效果验证。 周期2-3个月,提供T25稳筛细胞株一瓶,具体价格敬请来电咨询。
3 克 隆形成率实验
采用结晶紫或吉姆萨染色法,检测转入靶基因后细胞增殖情况,常规出示结果包括:克隆染色图及柱状分析图
4 细胞增殖实验
采用CCK8或MTT方法,检测细胞增殖的情况,使用CCK-8方法: 据活细胞线粒体内的脱氢酶可将试剂中的有效成分转变为有颜色的Formazan,并可被酶标仪检测,间接反应活细胞数量。具体价格敬请来电咨询。(包括4组细胞,每个样品3-5个复孔,客户可以选择检测时间点。)
6 细胞凋亡的分析
采用Annexin V / PI ; Annexin V-PE /7-AAD或客户自己提供合适的试剂盒,在流式细胞仪上对细胞样品进行细胞。
7 细胞迁移实验(Transwell)
8 细胞划痕实验
通过对划痕部位距离差异的计算,检测细胞迁移能力
9 Confocol实验:
通过融合荧光蛋白或荧光二抗,鉴定目标蛋白细胞内定位,利用抗原-抗体特异性结合的原理,用经荧光染料标记的抗体对细胞内的蛋白质进行定性或定量研究的方法。流程:细胞爬片 转染或药物处理 固定透化 封闭 一抗孵育 荧光二抗孵育 荧光显微镜观察拍照。客户需要提供荧光一抗及二抗,具体价格敬请来电咨询。
10 粘附实验部分
11 酶联吸附实验(ELISA) 4步骤帮您轻松检验各种蛋白大分子抗原:
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微生物反应器:
Infors 发酵罐 5L、 B.Braun 发酵罐 15L,50L、 NBS 发酵罐 20L, 300L、
表达系统:大肠杆菌和酵母菌
工作体积:10-200L
表达方式:包涵体、可溶、分泌等
原液制备规模:1-100g酵母发酵线服务能力
毕赤酵母高效表达菌株的构建和筛选;
多重蛋白酶缺陷型表达菌株的改造
符合cGMP要求的申报临床用样品的制备
新药开发综合服务:从工程菌的建库到新药注册申报配套支持等
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基因克隆技术在体外将DNA分子片段与载体DNA片段连接,转入细胞获得大量拷贝的过程中DNA分子克隆(或基因克隆)。其基本步骤包括:制备目的基因→将目的基因与载体用限制性内切酶切割和连接,制成DNA重组→导入宿主细胞→筛选、鉴定→扩增和表达。载体(vecors)在细胞内自我复制,并带动重组的分子片段共同增殖,从而产生大量的DNA分子片段。
实验流程:
1.以动物组织或者细胞为模版,提取获得DNA或者cDNA;
2.DNA/cDNA进行PCR获得目的基因;
3.构建重组表达载体;
4.获得含重组表达质粒的表达菌种;
5.测序、PCR、酶切检测验证构建重组载体成功。
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技术服务详细描述
公司可以为你提供课题设计,包括文献检索、查阅,分析实验思路的合理性,建议所需要的方法和检测所需的指标等等… ,还可以为客户提供完成整体实验的全过程。所涉及的领域有:分子生物学、细胞生物学、形态学、免疫学、药物筛选、动物模型构建等各项技术服务。我公司已经辅导、协助过华南地区的多家高校的研究生、博士,某大医院的医生等成功发表多篇SCI论文和国内核心文刊。
公司技术人员与客户交流和完成实验过程中,累积了大量的宝贵经验,特别为肿瘤相关研究,包括肿瘤发生发展的机理研究和不同方法治疗的研究中有了自已非常熟悉的研究方案,可以快速地设计和完成实验,已协助客户完成并发表4篇Cancer Research (影响因子6分),1-3分影响因子的SCI文章发表多篇,希望能通过我们的努力能帮助更多因实验技术的原因,而影响好的研究思路或好的治疗方案不能尽快展现世人,通过我们的努力可以让肿瘤及其它疾病的发生机理更清晰,让医疗工作者能尽快找到好的治疗方案。只要保证数据的质量和可信度,对科研就是促进!
常合作研究的方向:
1、肿瘤类:各种肿瘤发病机理研究,各项凋亡通路研究、shRNA及micoRNA影响肿瘤发生发展研究,肿瘤标记物筛选分析,肿瘤药物筛选研究,肿瘤发生前后各项基因表达差异分析等等。
2、心血管类:心肌梗死用不同生物治疗、化学药品治疗及中药有效成分治疗分析,不同原因引起的内皮细胞损伤研究,生物代替材料对心血管及其它脏器的影响研究等。
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预制 ORF 腺病毒
产品特色
▲预先包装,含有人源全长基因的腺病毒
▲腺病毒可以感染分裂或不分裂的动物细胞,包括原发细胞和干细胞
▲感染率可达 100%, 效率远高于其他病毒
▲所有的ORF 克隆融合了C-terminal Flag-His 标签,且适合用于蛋白纯化检测
▲腺病毒滴度经由Real-time PCR确认,最小滴度大于1X108/ml
▲插入基因片段经由基因特异引物 PCR 确认
▲Vigene每月生产至少1,500-2000 个预先包装的人源 ORF腺病毒
▲Vigene 并为客户制作不在现有腺病毒库中的任何腺病毒,对已有穿梭载体的克隆,2-3 周内可生产出腺病毒
声明:
1、Vigene生物科技公司的产品仅限用于研究,不可用于包括人类或体外诊断和治疗在内的其他用途。
2、Vigene生物科技公司的产品,不得修改和转售、转赠给任何第三方,未经Vigene生物科学公司的书面批准,不得将产品用于向其他第三方提供服务或用于制造商品化产品。
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