基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分型方法
简介
时间飞行质谱技术(MassARRAY) 是一个灵活、准确、高效的遗传分析系统,很适合中等通量到高通量的基因分型研究。系统支持重数很高的多重PCR反应,无需荧光标记的寡核苷酸引物,大样本量、多SNP位点的每个基因分型成本极低。
其分型位点能力在Illumina和RT PCR之间,一般而言,Illumina 比较适合超过700个的SNP检测,而RT PCR则适合大约30个SNP的筛选。
技术原理
多个单碱基延伸,MALDI-TOF 分子量检测
仪器设备
Liquid Handler 系统, Nanodispensor 芯片点样仪, MALDI-TOF Analyzer 质谱仪, 数据分析服务器,检测控制计算机,分型软件,Assay Design设计软件等
样品要求
只需5μl,2-2.5 ng DNA。
探针要求
3条引物,每条大约17-24bp。
自动化
MassARRAY 提供3站式自动系统1) Liquid handler 液体处理系统 2) Nanodispensor样品芯片点样 3) Analyzer & Software – 多芯片自动上样与分析。
通量
9小时可检测20张芯片,按每个孔20重PCR反应计算,约150000个SNP分型。
起做位点
◆ 4个SNP位点起做
◆ 等位基因频率分析:可以提供
其他应用
◆ 等位基因频率确定
◆ 基因表达定量
◆ SNP 发现
◆ Oligo 质量控制
◆ 基因甲基化分析
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联系方式
上海捷瑞生物工程有限公司 基因分型部
电话:021-67626119
传真:021-67626011
SNP分型部E-mail:snp@generay.com.
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亚克隆是对已经获得的目的片段进行重新克隆,从而对目的DNA片段进行进一步分析,或进行重组改造等。亚克隆的基本过程包括:①目的片段和载体的制备;②目的片段和载体的连接;③连接产物的转化;④重组子的筛选。
服务项目:
1. 目的基因的转载体
将含有目的基因的质粒采用双酶切的方法克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上。
2. 目的基因的PCR克隆
将模板(通常为质粒)上的一段序列通过PCR加入酶切位点后,克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上。
3. 采用EZ-T克隆系统,不受基因片段酶切位点限制,克隆到目的载体任何克隆位点。
4. PCR产物亚克隆
我们不建议您提供PCR产物进行亚克隆。如果您提供PCR产物,我们会先把产物克隆到T载体中,再进行亚克隆。这一过程需要加收TA克隆的费用。
5. 对已有载体进行改造。
提供结果
1. 高纯度质粒,大约2μg DNA,OD值在1.8~2.0之间
2. 含有重组质粒的甘油菌
3. 分析报告、测序图谱、质粒构建图、序列比对文件
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1) siRNA合成:化学合成siRNA的方法操作简便,容易获得高水平的瞬时沉默效果,特异性强。
2) RNAi载体构建:RNAi载体表达可以长时间稳定地研究基因功能,载体在细胞中持续抑制靶基因的表达可达数星期甚至更久。
3) RNAi干扰服务:利用脂质体转染技术,将siRNAs或RNAi载体转入细胞;用实时定量PCR方法检测mRNA水平的基因敲减效果,通过Western blot方法检测蛋白水平的基因敲减效果。利用抗生素来筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株。
4)慢病毒RNAi干扰服务:针对难于转染细胞(特别是神经细胞、悬浮细胞、干细胞)和In vivo实验,利用慢病毒RNAi载体构建和慢病毒包装等技术,使用慢病毒进行RNAi研究。
5)腺病毒RNAi干扰服务:针对难于转染细胞(特别是神经细胞、悬浮细胞、干细胞)和In vivo实验,利用腺病毒RNAi载体构建和腺病毒包装等技术,使用腺病毒进行RNAi研究。
1) siRNA合成:化学合成siRNA的方法操作简便,容易获得高水平的瞬时沉默效果,特异性强。
2) RNAi载体构建:RNAi载体表达可以长时间稳定地研究基因功能,载体在细胞中持续抑制靶基因的表达可达数星期甚至更久。
3) RNAi干扰服务:利用脂质体转染技术,将siRNAs或RNAi载体转入细胞;用实时定量PCR方法检测mRNA水平的基因敲减效果,通过Western blot方法检测蛋白水平的基因敲减效果。利用抗生素来筛选稳定表达shRNA或miRNA的细胞株。
4)慢病毒RNAi干扰服务:针对难于转染细胞(特别是神经细胞、悬浮细胞、干细胞)和In vivo实验,利用慢病毒RNAi载体构建和慢病毒包装等技术,使用慢病毒进行RNAi研究。
5)腺病毒RNAi干扰服务:针对难于转染细胞(特别是神经细胞、悬浮细胞、干细胞)和In vivo实验,利用腺病毒RNAi载体构建和腺病毒包装等技术,使用腺病毒进行RNAi研究。
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人源化的抗体能显著减少异源性单克隆抗体的免疫原性,提高其在人体内的活性,并延长在人血液循环中的半衰期。锐劲生物的科研团队,能够结合抗体分子的结构进行分子模拟,将抗体CDR区域移植到人源性的抗体分子中,并维持原有抗体分子的结构和对特定抗原的结合能力,为客户提供快速有效的抗体人源化服务。
人源化程度达到95%以上
维持原有亲和力和特异性
通过BIAcore T200进行亲和力评估
周期约4个月
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一、服务介绍
作为一家专业的生物技术服务公司,舜百生物提供从动物模型到细胞功能检测的全程技术服务,公司拥有独立的动物中心和细胞房,在细胞功能检测领域可以进行细胞迁移、侵袭、凋亡、周期、增殖检测(MTTCCK-8检测)、细胞药物筛选等技术服务。
细胞水平的药物筛选是种简单易行的检测药物在细胞中功能的方法。实验成本低、周期短、重复性好,可作为早期药物筛选的有效方法。
二、技术原理及优势
技术原理:细胞在合适的培养条件下能在体外生长、增殖,表现出与疾病密切相关的功能和特性。由此建立的多种药物筛选模型,可为药物的药效提供有效的评价,作为早期药物筛选的有效方法。
优势:与生化实验相比,该技术更能反应药物在生理水平的功能。与动物实验相比,该技术操作方便、周期短、重复性好。
三、操作流程
1、细胞培养与接种;
2、药物处理;
3、细胞生理学功能检测:细胞活力、细胞周期、细胞凋亡、基因转录、蛋白表达等;
4、数据统计分析;
5、实验报告撰写与提交。
四、客户提供
1.待测药物、对照药物;
2.待测药物相关信息;
3.所需细胞类型、药物处理方式、特殊操作要求等;
五、实验结果提供形式
1、细胞活力、细胞周期、细胞凋亡、基因转录、蛋白表达等原始数据、图片及分析结果
2、实验流程及报告一份
六、实验服务周期
具体周期需要根据细胞生长情况和药物处理方式确定。
七、质量承诺
提供清晰的细胞图片、可靠的检测数据和分析结果。
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自1998年Thomson成功建立第一株人类胚胎干细胞系以来,人类胚胎干细胞就成为了生命科学领域基础研究的热点,同时也成为了各类遗传性疾病临床治疗的新希望。但是在过去的十余年间,免疫排斥的问题使其应用于临床一直受到严重阻碍。直至2006年和2007年间,Yamanaka和Thomson等相继通过iPS技术将体细胞重编程至干细胞的状态,从而扫除了将人类胚胎干细胞应用于临床的最大障碍。
iPS 技术可以用于建立病人/疾病特异的iPS细胞系。疾病的iPS细胞系具有多种用途,一方面可以用于对特定疾病机理的研究,另一方面也可以针对特定的疾病进行体外筛药,可以更快更好地寻找到治疗该疾病的特定药物。病人特异的iPS细胞系将来也可以用于细胞移植治疗。
目前各国科学家正在竞相建立不同疾病的iPS细胞系。为了加速iPS技术在医疗应用上的发展,我们将利用已成熟的iPS技术,为大家提供产生iPS细胞系的服务,帮助大家尽快获得疾病特异性的iPS细胞系,使之更快地应用于后续的各种研究中。您只需提供疾病组织或者疾病特异性的原代细胞便可获得符合各项干细胞检测标准的疾病特异性的iPS细胞系。
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一、简介:
胰岛分泌的激素对于维持血糖含量具有关键作用,这也是糖尿病研究的一个关键因素。我们的主要目的是考察糖尿病药效检测体外模型的可靠性,目前已取得以下进展:
(i) 大鼠胰岛细胞的分离和保存;
(ii) 使用功能型海藻酸构建微囊化大鼠胰岛细胞;
(iii) 使用传统的2D和3D培养方法培养大鼠胰岛细胞;
(iv) 灌注式方法培养大鼠胰岛细胞;
(v) 大鼠胰岛细胞功能检测和药效检测。
二、药效检测:
(a) 使用荧光死活染色法检测细胞活率;
(b) 使用ELISA试剂盒检测葡萄糖刺激的胰岛素 分泌量;
(c) 使用传统的2D和3D,以及灌注和非灌注方法培养大鼠胰岛细胞;
(d) 检测GLP-1和甲糖宁的药效;
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服务介绍
提供重大传染病类(疟疾、艾滋及结核等)和滥用药物(滥用毒品、滥用农兽药残留)检测试剂、仪器及其技术培训服务。服务提供单位广州万孚生物技术有限公司已通过ISO9001以及欧洲ISO13485质量认证体系考核,是中国首批通过国家部分三类体外诊断试剂(HIV和HCV)体系考核的体外诊断试剂生产企业之一,多年致力于传染病类和滥用药物快速检测试剂的研究开发。传染病类(疟疾、爱滋)产品取得国内SFDA注册或受理,并与非洲13个国家卫生部及疟疾控制中心建立合作伙伴关系;毒品检测全系列产品通过美国FDA和欧洲CE认证,为公安部禁毒指定专供产品,目前已经为国内50%以上的省会城市征兵体检提供配套的检测试剂及技术培训服务,并与欧盟警察署、菲律宾警察局等政府机构提供新型毒麻类产品检测定制服务,包括OXP,PXP以及唾液检测项目服务。
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我们的技术可靠,服务周到,提供从设计到目的片段测序的全程服务。让需要载体构建的研究团队能最快的进入下游工作。欢迎询价详谈。
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本公司可提供各种动物模型的制作,主要涉及以下几个方面:
1 小鼠肿瘤模型 主要为裸鼠及其它普通小鼠的移植性肿瘤动物模型制作
2 心血管系统疾病模型 心肌缺血及再灌注、心梗、血压测定(麻醉及清醒状态下)、抗血栓等
3 糖尿病疾病模型 STZ诱导的糖尿病模型及糖尿病药物筛选
4 抗肥胖药物筛选模型 大麻素CB1受体拮抗剂——食欲控制
5 神经系统疾病模型 镇静、镇痛动物模型行相关的行为学模型制作及药物筛选
6 高通量筛选模型
7 骨质疏松症模型 切除卵巢/睾丸致骨质疏松
8 肝脏疾病模型 急性肝损伤模型及脂肪肝模型
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上海丰核信息科技有限公司,是由上海交通大学教授及其实验室团队联合具有丰富企业管理运营的职业经理人创建的一家专注于生物信息学分析的高科技创新型企业。丰核信息团队核心成员由上海交通大学,香港大学,美国贝勒医学院,华东师范大学的生物信息学高学历人才组成。公司已经建成并完善了流程化的智能网络分析平台以及文本挖掘系统平台并申请了相关专利。
公司致力于为生命科学领域研究者提供专业的生物信息学服务,主营业务包括个性化科研目为导向的数据挖掘,算法开发,高通量生物学芯片数据分析,数据库开发以及基于生物信息学分析探路的实验路线设计,实验外包,结果分析以及SCI论文修改等服务。
基金申请服务
1科研工作者申请科研基金的过程中缺少科研基础,或者是为研究方向没有坚实的研究基础,是科研基金申请失败的重要原因。
2科研工作者第一次申请科研基金,将会在申请过程中遇到种种困惑和陷阱。怎样选题,标题怎么写,投放那些学科,创新性如何体现,种种问题让写基金的科研工作者功败垂成,只有寄希望于不断的努力。
解决方案:
1 MicroSCI以客户的研究方向为导向,综合运用生物信息学技术方法预测可能结果。结果报告可放入基金申请的标书的立项依据部分,让您的研究更加有理有据。
2 MicroSCI拥有强大的科研申请基金专家团队,在自己的科研和学习工作中积累了丰富的经验和资料。欢迎您来信索取有关免费资料。
原理
客户提供研究方向关键词(基因名称,疾病名称或其他信息),microSCI使用计算机文献挖掘的方法挖掘文献数据库中对关键词进行描述的信息,然后对客户自己拥有芯片或者是公共数据库中已有芯片进行深入挖掘,进行后续的转录调控网络构建,蛋白质相互作用网络构建,信号通路分析,基因功能富集分析,并且预测潜在和疾病有关的基因,从而后续研究提供了研究方向和指导建议。
意义
1、深入挖掘客户的芯片结果,提升发表文章的档次。
2、验证芯片结果可靠性。
3、通过构建基因调控网络,可以从转录调控角度揭示基因之间的相互作用。
4、进行信号通路有关的分析,可以寻找疾病的有关的重要信号通路。
5、总体了解把握研究方向并且寻找和现有研究方向有关的新的热点和创新点,可以运用于基金申请的项目立项,研究背景以及科研论文综述类写作方面。
分析实例
文献挖掘结合芯片挖掘预测潜在疾病有关基因
项目概述:
客户提供关键词“肺癌”和“甲基化”2组关键词,我们帮助客户找出已经研究证实的肺癌甲基化有关的基因,并结合甲基化的芯片进行分析预测哪些基因可能通过甲基化的方式在肺癌的发生发展中起作用。
分析方法:
1 利用关键词搜索文献数据库获得所有肺癌甲基化相关的文献。
2 利用计算机文献挖掘的方法对文献进行挖掘,找到相肺癌甲基化相关的所有基因/蛋白。
3 从公共数据库中寻找芯片数据或者是客户自行提供其芯片数据。
4 使用meta分析的方法整合芯片数据,寻找芯片甲基化有关基因。
5 根据蛋白质相互作用关系构建已有文献挖掘基因集合和甲基化基因集合的关系。
6 通过整合文献挖掘结果,转录调控数据,蛋白-蛋白相互作用,基因融合等数据,建立一个肺癌相关的小分子相互作用的调控网络。
7 分析网络,得到潜在的可能和肺癌发生发展有关的基因。
----------联系时,请注明信息来自“丁香通”------------
联系我们:
技术支持负责人:
金先生13817653508 刘小姐13917422614 蔡小姐13620060577
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概述
全基因组全新测序(de novosequencing)不需要任何参考序列即可对某个物种进行测序,用生物信息学分析方法对测序序列进行拼接组装,从而获得该物种的基因组序列图谱。通过基因组测序是快速了解物种的重要途径,可加深对所测物种生长、发育、进化、起源等重大问题的认识。自成立以来,CHGCS先后承担和参与了人类基因组测序、水稻4号染色体测序、黑猩猩22号染色体测序、日本血吸虫基因组测序等多个重大项目,研究成果发表于Nature、Science、Nature Genetics、PNAS等众多国际权威学术期刊。
测序策略
估计基因组大小,能否提供单倍体;
需要100ug左右的DNA;
进行ITS和16s检测,确保物种正确及没有细菌污染;
初步测序:先用solexa做30-50倍覆盖率的300bp文库的Paired-end测序,拼装后评估基因组大小及杂合度;
深度测序:solexa测3个Paired-end库(170bp,300bp和500bp),做到100倍覆盖率;至少用454做2倍覆盖率;
框架图:在上述测序拼装的基础上,加测100倍覆盖率的solexa Mate-pair文库(3kb,8kb和20kb);
如果是复杂基因组,需要构建BAC文库,基于BAC末端测序结果进行全长测序。
参与的项目及研究成果
人类基因组计划:3号染色体短臂近着丝粒区,29BAC,3.35Mb序列
水稻(粳稻)4号染色体精细图:112BAC,10Mb序列
黑猩猩22号染色体测序:40BAC,5Mb序列
日本血吸虫基因组测序
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上海迈程医疗器械有限公司
最新推出HLA-A02位点高分辨分型服务(SBT),另可根据您的需求,提供HLA各个基因位点的SBT测序服务。欢迎来电垂询!
专业提供DNA/RNA快速提取试剂、HLA高低分辨分型(A,B,C,DR,DQ),B27位点检测及分子生物学耗材试剂。
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2006年,日本京都大学的Yamanaka实验室通过在小鼠皮肤细胞中表达四个转录因子(Oct4、 Sox2、c-Myc 以及 Klf4) ,成功将体细胞重编程为诱导多能干细胞 (induced pluripotent stem cells, iPS)。以此为基础Yamanaka 和 Thomson小组于 2007年几乎同时宣布成功获得人类iPS细胞,由此将iPS 技术推向了生物医学的前沿,引发了全世界iPS 研究的浪潮。iPS 技术更被誉为继克隆技术、胚胎干细胞技术之后干细胞领域的第三大革命。由于同时具备深远的科学价值和广泛的应用价值,在2007年分别被Nature、Science评为第一大和第二大科学进展后,又在2008年荣登Science十大科技进展榜首。
通过病毒作为载体进行重编程获取iPS细胞是目前使用最为普遍的方法,无论用逆转录病毒、慢病毒还是腺病毒做载体均可能增加病毒感染细胞的风险,而且还增加了病毒载体插入细胞基因组造成的风险,这样严重影响iPS细胞将来应用于再生医学的安全性。
赛贝生物只用非病毒的方法产生iPS细胞,保证所产生的iPS细胞无外源基因整合。
Don’t let the wrong reprogramming method
invalidate your scientific results or worse!
我们为每一个细胞样本提供:
3 clones
G显带核型分析
多潜能标志物的免疫荧光染色
畸胎瘤三胚层HE 染色
重编程的细胞类型:
各种成纤维细胞
各种上皮样细胞
外周血单核细胞
各种间充质细胞
重编程的细胞所属物种:
人
小鼠
猪
注: 重编程细胞最好处在低代数,倍增时间在12-24小时。慢速分裂的细胞重编程效率较低,所以这样的细胞重编程的成功性不能保证。
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低温快递服务简介
医药冷链是指对生化样本、低温药品、疫苗及相关原材料等从原料采购、样本采集、生产、研发、临床试验、存储及运输等各个环节实施全程低温监控,其最根本的特征是严格的温度和时限控制。
北京优冷冷链科技有限公司应用独有的专业低温包装核心技术,建立了国内各主要城市的低温快递营运网点,同时结合联邦快递、中外运-敦豪等快递公司的快速有效的网络,强强联合,推出国内各个主要城市之间及发往世界各地的门到门低温快递服务。
我公司主要承接各种血样、尿样、药品、细胞珠、动物样本等需要严格温度控制的医药样品的门到门低温快递服务。只需您的一个电话,其它的事情交给我们来为你操办,我们将全程冷链,确保将您的低温样本安全快捷的送达您想到达的世界各地。
我们的优势
快捷可靠的服务网络
优冷经过多年的筹建,已经建立了国内各主要城市的低温快递营运网点,同时,我公司与联邦快递、中外运-敦豪等知名国际快递公司建立了战略合作,已经开通国内各个三级以上城市之间,以及从国内出发到达世界各地的门到门低温快递网络,让您的样本安全快捷的送达您需要送达的地方。
世界领先的冷链包装技术
优冷掌握世界领先的低温冷链包装的核心技术,不管您的药品温度是冬季怕冻、或者需要2~8℃、,-20℃以下、-80℃超低温保存,我们都能提供3~14天的低温冷链包装方案,让您的样本始终处于安全可靠的环境下运输。
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我们熟悉冷链运输行业的各种特点与政策,我们知道如何根据客户的个性化需求,我们应用多年操作经验及专业的冷链包装技术为客户量身定制方案。
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优冷经过多年专业、诚信的运营,已经培养了一大批忠实客户,长期为科研院所的全国性调研项目提供冷链快递服务,我们的客户遍及科研院所、生物制药企业、出入境检验检疫局、医院、CDC......
安排取件电话:
010-84648402-8005分机 15611064218 徐先生
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多用途的泰冷I代Talen载体,可用于细胞系转染和mRNA制备用途,Talen mRNA可用于受精卵注射制备基因敲除和基因敲入动物。
骨架载体:
pXantho1.Green pCAG-SP6-TALEN+63-IRES-EGFP
pXantho1.Red pCAG-SP6-TALEN+63-IRES-mCherry
pXantho1.Hygro pCAG-SP6-TALEN+63-IRES-HygroR
pXantho1.Neo pCAG-SP6-TALEN+63-IRES-NeoR
pXantho1.Puro pCAG-SP6-TALEN+63-IRES-PuroR
系统介绍:
泰冷I代载体与同类载体最显著的差异在于载体上带有抗性标记和荧光,可以用来指示Talen的表达。其中Puromycin抗性基因可用于转染后的短时间筛选。经过筛选,未转染的细胞会被杀死,从而富集转染阳性细胞。同样如果选用带荧光的载体,我们可以通过流式分选富集转染阳性的细胞。
泰冷I代载体采用avrBs4的序列骨架,保留N端152氨基酸和C端63氨基酸的最佳结构,具有良好的核酸酶切割活性,同时泰冷I代的靶位点可以是17-22个碱基(包括打头的T碱基),具有极好的灵活性。
客户所得:
超纯质粒50μg,甘油菌1ml,Talen载体正反向测序引物;
测序结果及分析比对
操作说明书。
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您是否还在为一堆数据放在手边不知如何处理而苦恼?
您是否还在为不熟悉统计方法而面对浩瀚数据手足无措?
您是否还在为得不到统计专家的支持而无法正确开展科研设计而担忧?
公司优势: 我们拥有多位来自国内外的生物统计学专家, 熟练 SAS , SPSS 等统计学软件,有丰富的数据分析经验和科研方案设计经验,依靠强大的专家团队,全程为您提供专业的支持。
服务内容:
(一)统计咨询
包括研究设计、研究主题与研究目标确定、设计调查问卷、抽样方法与研究方法确定、样本含量估计、观察指标确定、数据收集方法、数据整理等方面的咨询,以及提供完整的统计分析解决方案;
(二)资料整理、录入
包括数据库建立、数据录入、数据集整理、数据质量控制;
(三)数据分析
包括各种统计方法、图表制作及其结果的解释和提供统计结果分析报告;
收费标准及周期: 议价
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详情请见:http://www.superbiotek.com/productshow.asp?/1785.html
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无论是对科研中遇到的未知化合物的结构鉴定还是产品中有效成分的结构剖析,安隆科讯的服务都会跟您密切相关。
本公司具备专业的团队,在分离方法、结构鉴定、出具报告等方面都具有很高的专业素养。基于样品背景信息,结合
多种业界公认的分析测试技术手段,制定快速、专业的结构归属、鉴定方案,并出具详细的专业水准的结构鉴定报告,是
本公司服务的一贯宗旨。
安隆科讯为以下常见领域中出现的化合物提供谱图分析和结构解析服务:
•化工
•医药
•食品
•橡胶
•石油
详情请电话或邮件联系我们。Tel:027-87258771,QQ:2801482460,email:sales@anachro.com。
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