β-actin是一种高度保守的蛋白,以恒定水平遍布于所有哺乳动物细胞中,既使在许多情况下进行实验性的处理或技术操作也不影响,因此,测定β-actin一般用于防止实验差错的对照。美国Signosis提供的β-actin 酶免试剂可检测内源性β-actin的水平,用于人、小鼠、大鼠样本大部分酶免试验的对照。
A. 优点:
β-actin Elisa 试剂具有下列优势:
· 在蛋白水平上标化样本---可用于标化不同样本,包括各种诱导样本和蛋白水平的不同组织。
· 高效灵活---来自不同种类的样本,如人、小鼠和大鼠,可选择相应数量的检测孔同时分析。
· 特异性强---优选高度特异的针对CA125的配对抗体。
· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统
B. 原理:
β-actin酶免试剂为固相酶免法。该方法采用β-actin兔多克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗β-actin单抗做检测抗体,待测样品同时与捕获抗体和标记抗体反应后,β-actin夹在二者之间。孵育后,洗去未结合的标记抗体。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。β-actin的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。