miRNA实时PCR检测试剂

　　miRNA参与许多生物学活动，其异常表达与不可治愈的疾病有关，是一类很有前途的标志物。有许多PCR方法分析miRNA的表达水平。基于自有专利技术，美国Signosis开发了一种高灵敏、高分辨的实时PCR方法，用于检测miRNA的表达，其应用寡核苷酸连接和基于实时PCR的SYBR green。该方法可用于总RNA或细胞裂解物中的miRNA表达的定量分析，无需进行cDNA转换。 　　A. 优点： 　　美国Signosis公司miRNA实时PCR检测试剂具有以下优点： 　　·便利---试剂盒包含了从细胞裂解到PCR所有试剂。 　　·无需RNA制备---细胞裂解物可直接用于反转录，尽管用总RNA更好。 　　·实时---分析可以实时监测 　　B. 原理： 　　该方法中，靶miRNA分子与二对oligo连接，形成RNA/DNA复合物。当序列完全匹配时，这二对oligo与miRNA连接，二对oligo的节点通过DNA酶连接。miRNA之间单个寡核苷酸的差异就会阻止杂交或连接。寡核苷酸对连接上后，连接分子可进行实时PCR。