miRNA 荧光素酶报告载体

　　pMiR-LucTM是一系列基于荧光素酶的报告载体，用于定量测定细胞中的miRNA表达。每种载体含有CMV启动子、荧光素酶基因、独特的3 ' UTR miRNA靶位点和SV40终止子序列。 靶位点是与特定miRNA完全互补的序列。 当miRNA表达时，miRNA与该序列结合，导致荧光素酶基因表达的抑制。 因此，荧光素酶的活性代表miRNA的表达的活性。 当pMiR-Luc报告载体转染哺乳动物细胞时，可用于检测内源性的miRNA表达和活性或者用于监测miRNAs的上调或下调。 　　A. 优点: 　　MiRNA 荧光素酶报告载体具有以下优点: 　　· 功能性检测 –是一种功能性的分析方法，用于监测细胞内的miRNA表达. 　　· 可定量分析 - miRNAs表达和活性通过荧光素酶基因表达的抑制进行监测. 　　· 可构建稳定细胞系 –载体可用于构建表达报告基因的稳定细胞系 　　B. 原理： 　　MiRNA在荧光素酶RNA下游的3' UTR与靶位点结合，抑制荧光素酶表达，使酶活性下降。 通过比较二个样品中的酶的活性， miRNA是上调还是下调可以定量测定。MiRNA报告载体见下表(如需要表中未列出的，可订制)。