肿瘤坏死因子-α (TNFα),是在急性炎症时由巨噬细胞或单核细胞产生的炎症细胞因子,负责细胞内的多种信号事件,引起坏死或凋亡。 TNFα对实体瘤生长、进展和转移的关键性血管形成也很重要。此外,TNFα同肥胖症联系在一起,在肥胖啮齿类动物和人脂肪组织慢性升高,也许代表了肥胖和胰岛素抵抗之间的一个重要联系。在肥胖鼠和人脂肪组织中TNFα过渡表达。TNFα抑制胰岛素信号,至少部分是通过阻断胰岛素受体酪氨酸激酶活性和导致胰岛素受体基体1 (IRS-1)的丝氨酸磷酸化。然而还不清楚的是肥胖症期间由脂肪细胞产生的TNF-α的生理刺激物是什么,IRS-1在细胞TNF-α处理后如何抑止胰岛素受体酪氨酸激酶的活性。更好理解TNF-α和胰岛素信号通路之间的联系对发现肥胖症期间胰岛素抵抗状态的治疗是非常重要的。
A. 优点:
· 性价比高——高质量,低价格
· 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量
· 特异性强——优选高度特异的针对鼠TNFa的配对抗体
· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统
B. 原理:
鼠TNFα试剂为固相酶免法。方法采用羊抗鼠TNF-α抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗鼠TNFα抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品鼠TNFα夹在捕获抗体和标记抗体之间,与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。鼠TNFα的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。