生长因子是能够刺激细胞生长、增殖和分化的蛋白质家族,典型的是通过与细胞表面的受体结合作为信号分子。 许多生长因子有相当多的功能,一些生长因子刺激许多不同类型细胞的分裂,而另一些生长因子是特异的针对特定细胞类型。 多个生长因子经常一起参与细胞的活动。 例如, VEGF、FGF和EGF刺激血管形成。 所以,描绘出生长因子的表达方式为阐述细胞活动的生物学机制提供了宝贵的视野。美国 Signosis的生长因子复合酶免试剂可定量地描绘和测定8种蛋白 VEGF、EGF、TNFa、IFNr、PDGF-BB、PIGF、b-NGF和SCF。
A. 优点:
· 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种生长因子
· 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品
· 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA-1062为做标准曲线提供标准品。
· 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器
· 操作简单---一12x 8孔预包被板的完整操作系统.
B. 原理
板条每个孔包被有针对生长因子的特异抗体,8个孔包被有8种不同抗体,一个板条8个孔可测定8种不同蛋白质。待测样品中的生长因子在固相抗体和酶标记抗体之间,可与二个抗体组成的抗体对反应。孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。生长因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比。 450 nm处测定吸光值进行定量。