细胞因子是在多种生物活动中发挥重要作用的必不可少的细胞分子,这些生物活动包括病毒感染、炎症、免疫和造血。细胞因子是由多种类型的细胞在对不同的刺激应答时产生。一种细胞因子基因的表达受其它细胞因子的调节。细胞因子基因表达的调控异常可以由染色体改变或由于引发表达机制激活或失活的病毒感染引起。因此检测细胞因子对理解这些生物活动有重要作用。美国Signosis公司人8种细胞因子复合酶免试剂I可同时检测8种细胞因子:VEGF、EGF、IL-6、Resistin、PAI-1、IL-12、IL-13和 Eotaxin。该试剂板条的每孔包被有抗特定细胞因子的特异抗体,板条上的8个孔可测定8种不同的细胞因子抗体。二个样品中细胞因子的差异可通过数据比较加以测定。
A. 优点:
· 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种细胞因子
· 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品
· 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA-1082为做标准曲线提供标准品。
· 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器
· 操作简单---一12x 8孔预包被板的完整操作系统.
B. 原理
板条每个孔包被有针对细胞因子的特异抗体,8个孔包被有8种不同抗体,一个板条8个孔可测定8种不同蛋白质。待测样品中的细胞因子在固相抗体和酶标记抗体之间,可与二个抗体组成的抗体对反应。孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。细胞因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比。 450 nm处测定吸光值进行定量。