NFkB荧光素酶报告载体Hela稳定细胞系

　　NF-kB在调控免疫、炎症、发育、细胞生长和凋亡的生物学过程中发挥重要作用。针对刺激如压力、细胞因子、自由基、紫外线、细菌和病毒抗原的应答中，NF-kB激活后，从细胞质转至细胞核，在此与启动子区的相应因子结合，调节广泛的基因表达谱。不正常的NF-kB活性与癌症、炎症和自身免疫和病毒感染相关联。监测NF-kB活性对揭示这些疾病的机理和药物发现至关重要。美国Signosis 建立的NFKB荧光素酶报告载体Hela稳定细胞系，其荧光素酶活性与NFKB活性特异性的关联。因此，细胞系可用作报告系统，以监测不同应用中NFKB的活性，如药物发现。 　　A. 优点： 　　·NFkB荧光素酶报告载体Hela稳定细胞系具有下列优势： 　　· 高敏感性和反应性——细胞系对TNF刺激反应诱导信号高，动力学反应宽。 　　·一致性——用NFKB反应因子构建的NFKB报告载体在细胞系中稳定表达，避免了实验变异。 　　·节省时间——细胞系即用于研究NFKB信号传导。 　　B. 原理： 　　NFKB荧光酶报告载体转染建立的细胞系，带有可进行潮霉素筛选的潮霉素表达载体，TNF-α诱导的荧光素酶活性筛选出潮霉素抗性克隆。筛选出的高诱导倍数(100倍)的克隆，再扩大产生稳定的细胞系。