AP1是一种由jun和Fos蛋白组成的二聚体蛋白复合物,在调控细胞死亡、增殖和转化中起着重要作用。AP1蛋白可由许多刺激物激活,这些刺激物包括TPA、血清、生长因子、oncoprotein、TNF和IL-1,以及各种环境压力,如UV照射。AP1激活时在靶基因启动子区与AP-DNA识别因子结合,调控基因表达。美国Signosis 公司研发的AP1滤板法检测试剂用于检测AP1的DNA结合活性,可同时分析多个标本。
A. 优点:
美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的AP1滤板法检测试剂,具有下列优势:
· 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速
· 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析
· 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少
· 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析
B. 原理
美国Signosis 公司研发的AP1滤板法检测试剂,是基于微孔板检测AP1活性的分析方法,预标记AP1的DNA结合序列与核抽体物混合,形成AP1-DNA复合物。过滤板用于保留结合的AP1探针,除去游离的DNA探针。结合的预标记的AP1探针随后从过滤板上洗脱、收集,与相应孔的杂交板杂交。捕获的AP
1探针进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测,在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。