ERs(ERa和ERb)参与雌激素的细胞信号传递,属于转录因子核受体家族。ERs调控的作用机制是在靶基因启动子部位或通过蛋白与蛋白的相互作用,与配体结合的ERs直接与雌激素反应因子结合。美国Signosis 公司研发的ERs滤板法检测试剂与常规的凝胶迁移试验不同,它是一种高通量的检测方法,可同时分析多个标本,而且该方法在分析少量标本时较非放射的凝胶迁移试验简单的多,较基于P32的凝胶迁移试验安全的多。
A. 优点:
美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的ERs滤板法检测试剂,具有下列优势:
· 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速
· 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析
· 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少
· 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析
B. 原理
美国Signosis 公司研发的ER滤板法检测试剂,是基于微孔板检测ER活性的分析方法,该方法中使用二块板---过滤板和杂交板,预标记的ER结合因子(ERE)与核抽体物混合,形成ER/探针复合物。过滤板用于保留结合的DNA序列,除去游离的DNA序列。结合的预标记的DNA序列随后从过滤板上洗脱、收集,用于微孔板杂交。捕获的DNA序列进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测,在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。