NFkB滤板法检测试剂

　　核因子-kB(NF-kB)是一种转录因子，调控参与免疫反应、凋亡和细胞周期的基因表达。NF-kB可以由各种刺激物激活，这些刺激物有细胞因子、T、B细胞有丝分裂原、病毒蛋白、压力诱导物。刺激导致其抑制物IkB的磷酸化，使NF-kB从IkB复合物中释放出来。解离后，NF-kB从细胞质转至细胞核，与靶DNA因子结合，正向调节靶基因的转录。检测NF-kB的活性对研究NF-kB的激活及相关通路的潜在机制至关重要。美国Signosis 公司研发的NF-kB滤板法检测试剂与常规的凝胶迁移试验不同，它是一种高通量的检测方法，可同时分析多个标本，而且该方法较非放射的凝胶迁移试验简单的多，较基于P32的凝胶迁移试验安全的多。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的NF-kB滤板法检测试剂，具有下列优势： 　　· 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速 　　· 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析 　　· 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少 　　· 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析 　　B. 原理 　　美国Signosis 公司研发的NF-kB滤板法检测试剂，是基于微孔板检测NFkB活性的分析方法，该方法中使用二块板---过滤板和杂交板，预标记NFkB的DNA结合序列与核抽体物混合，形成NFkB与预标记的DNA序列。过滤板用于保留结合的DNA序列，除去游离的DNA序列。结合的预标记的DNA序列随后从过滤板上洗脱、收集，用于微孔板杂交。捕获的DNA序列进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测，在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。