HIF滤板法检测试剂

　　缺氧诱导因子(HIF)被认为主要在维持氧代谢和能量代谢中发挥重要作用。HIF是异源二聚体转录因子，分别由HIF-1和HIF-2组成，与b-亚单位二聚化后，与靶基因启动子的缺氧反应因子结合。HIF活性由各种刺激物调控，包括细胞氧浓度、生长因子、致癌活性等的变化。美国Signosis 公司研发的HIF滤板法检测试剂与常规的凝胶迁移试验不同，它是一种高通量的检测方法，可同时分析多个标本，而且该方法较非放射的凝胶迁移试验简单的多，较基于P32的凝胶迁移试验安全的多。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的HIF滤板法检测试剂，具有下列优势： 　　· 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速 　　· 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析 　　· 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少 　　· 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析 　　B. 原理 　　美国Signosis 公司研发的HIF滤板法检测试剂，是基于微孔板检测HIF活性的分析方法，该方法中使用二块板---过滤板和杂交板，预标记HIF的DNA结合序列与核抽体物混合，形成HIF/探针复合物。过滤板用于保留结合的DNA序列，除去游离的DNA序列。结合的预标记的DNA序列随后从过滤板上洗脱、收集，用于微孔板杂交。捕获的DNA序列进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测，在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。