pTF-Luc报告载体是一系列用于定量测定细胞内转录活性构建的载体。每个载体含有cis因子(DNA结合序列)— 一种最小的启动子,荧光素酶基因。当TF激活,其与cis因子结合,导致诱导荧光素酶基因的表达。因此荧光素酶活性代表TF的活性。
A. 优点:
TF荧光素酶报告载体具有下列优点:
· 功能性检测---功能性方法检测TF的活性
· 定量分析---TF活性通过通过荧光素酶基因表达加以测定
· 稳定的细胞系---载体可被用于建立表达报告体的稳定细胞系
B. 原理
TF靶向TATA启动子上游的结合位点,诱导荧光素酶基因的表达,产生荧光素酶活性。通过比较2份样品荧光素酶的活性,TF上调还是下调可以定量测定。