药物中毒主要是由药物代谢引起的。药物可以由药物代谢酶生物转化成为毒性或非毒性代谢物。许多蛋白家族如P450s、UDP-glucuronosyltransferases、sulfotransferases、阴离子转运蛋白和多种药物抗性蛋白参与药物代谢过程,催化内用药物的氧化。这些酶表达水平的变化是药物代谢个体差异的主要因素。美国Signosis公司的人药物毒性cDNA微孔板阵列检测试剂可检测22 种药物代谢相关基因的表达。
A.优点:
美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的药物毒性cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:
·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。
·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。
·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。
B. 原理:
美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。