过氧化物酶增殖物激活受体r(PPARr)是转录因子核受体超级家族成员之一。PPARr在各种生物过程中非常重要,如脂肪细胞分化、糖代谢、脂质堆积及血管功能和高血压。PPAR-r以受体依赖的方式通过靶基因转录发挥其作用。激活时,PPARr-RXR异源二聚体在靶基因启动子部位与特异的DNA序列结合,调节转录。美国Signosis公司PPARr 调控的cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种PPARr 调控的基因。
A. 优点:
美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的大鼠PPARr 调控的cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:
·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。
·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。
·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。
B. 原理:
美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。