T细胞是一类在免疫反应中起着重要作用的淋巴细胞。T细胞受体是一种合成体蛋白,参与T细胞抗原应答时的激活,这种激活需要受体合成体亚单位和其它膜分子,使细胞外受配体反应与下游的信令通道结合,如肌酸磷酸的增加,细胞外钙水平和蛋白磷酸化增高。TCR激活促成许多信号级联反应,通过调节细胞因子的产生、细胞生存、增殖和分化,最终确定细胞的命运。美国Signosis公司人T细胞受体信令cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种相关基因。
A. 优点:
美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人T细胞受体信令cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:
·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。
·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。
·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。
B. 原理:
美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。