Wnt信号通路对胚胎发育生成非常重要。β-Catenin,通路的中心部分,做为转录因子TCF/LEF家族的辅因子进行活动,通过与下游靶基因启动子结合激活Wnt靶基因的转录参与细胞增殖、生存和转移。许多蛋白包括APC和Axin参与Wnt信号通路的调控。美国Signosis公司Wnt/b-Catenin信号通路cDNA微孔板阵列试剂可同时测定20多个参与此通路的相关基因表达。不同样本这些基因表达差异可应用该试剂盒进行测定。
A. 优点:
美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人Wnt/b-Catenin调控的cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:
·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。
·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。
·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。
B. 原理:
美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。