转录信号传导和激动剂3(Stat3)是一种转录因子,其参与多种细胞因子和生长因子的细胞核反应,在细胞生长和凋亡中发挥作用。Stat3还参与细胞转化。细胞内的Stat3异常激活可做为药物的靶标。Stat3由酪氨酸磷酸化激活,对广泛的细胞因子、生长因子、激素进行应答。酪氨酸磷酸化引发Stat3形成二聚体和核转移。Stat3介导参与各种生物过程如细胞生长和分化的靶基因的表达。美国Signosis公司的Stat3-调控的cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20 多种Stat3靶基因的表达。(详见:http://www.zhongzhibio.com/kysj/493.htm)
A. 优点:
美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人Stat3-调控的cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:
·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。
·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。
·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。
B. 原理:
美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。