人HIF-调控的cDNA 微孔板阵列检测试剂

　　快速生长的肿瘤会出现缺氧区，大部分细胞对缺氧的反应是(1)产生VEGF和其它缺氧诱导的血管生成因子以促进增加血管生成，从而增加组织的氧合(2)从有氧的磷酸化到缺氧的糖酵解的代谢转换。缺氧诱导因子-1(HIF-1)是在缺氧反应过程中有重要作用的一种氧调控转录激动剂。HIF-1a亚单位是氧依赖性泛素化和蛋白酶体降解。细胞因子如白介素-1和肿瘤坏死因子-a刺激HIF-1依赖的基因表达。HIF-1增加促进血流及炎症的数种基因的表达，如血管生成因子(VEGF)。美国Signosis公司的HIF-1调控的cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20 多种相关的基因。 　　A. 优点： 　　美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人HIF-调控的cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点： 　　·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 　　·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 　　·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 　　B. 原理： 　　美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板芯片专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法，该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似，加入生物素-dUTP后，总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸，将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物，cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。