凋亡是一种程序性细胞死亡过程,包括细胞质浓缩,细胞收缩,染色质浓缩,膜空泡化,核脆裂,形成凋亡小体,在此过程中,发生一系列的生化反应,如细胞内蛋白酶的激活,凋亡相关基因调节的激活。美国Signosis公司凋亡相关cDNA微孔板芯片检测试剂为检测凋亡调节基因的表达提供了一种简便的方法。人凋亡cDNA微孔板阵列检测试剂是基于微孔板阵列的方法,可检测20 多种凋亡相关的基因表达。
A. 优点:
美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的凋亡cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:
·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。
·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。
·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。
B. 原理:
美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。