NFkB 是一种广泛存在的转录因子,在细胞对各种刺激的反应中起着重要作用,这些刺激包括:压力、细胞因子、自由基、紫外线照射、氧化的LDL、细菌和病毒的抗原。NFkB的异常调节与炎症、自身免疫性疾病、脓毒性休克、病毒感染和不适当的免疫进展相关联。激活时NFkB参与免疫和炎症反应、细胞调节以及凋亡的相关基因的表达。为了方便在少量细胞中监测与细胞生物功能相关基因的表达, 美国Signosis公司研发了一种直接在细胞裂解物中或总RNA中分析8种NFkB调节基因实时PCR方法。
A. 优点:
Signosis公司NFkB调控基因的实时PCR检测试剂具有以下优点:
·便利---从细胞裂解、反转录直到PCR,试剂盒包含了所有试剂。
·无需RNA制备---细胞裂解液可直接用于反转录。
·实时---分析可以实时监测
B. 原理:
Signosis公司实时PCR检测试剂通过mRNA反转录成cDNA以及实时PCR监测8种因子的表达,纯化的总RNA或细胞裂解物先反转录成cDNA,靶基因再通过实时PCR分析。