miR-21微孔板检测试剂

　　miR-21 在各种Ca症中出现过度表达，被认为是下调肿抑制因子的Ca基因，包括程序性细胞死亡4 (PDCD4)、肿抑制因子Pdcd4、PTEN 肿抑制基因和肿抑制基因的原肌球蛋白1 (TPM1)。miR-21 是Ca细胞生存的重要调节因子，与抗凋亡蛋白表达激活的IL-6/Stat3介导的生存通路不同，miR-21由Stat3上调，通过抑制TPM1 和/或其它蛋白介导凋亡的抑制。中帜生物研发的miR-21微孔板检测试剂提供了一种分析miRNA分子一种简便快速的方法。 　　A.优点： 　　中帜生物基于其自有专利技术的miRNA微孔板检测试剂具有下列优点： 　　·操作简单——做miRNA试验象做ELISA试验，无需用酶转换miRNA成cDNA，检测步骤只是孵育和洗涤 　　·灵敏度高——较miRNA Northern blotting分析敏感100倍 　　·分辨力强——在分辨同源miRNA 时，较Northern blot有更高的分辨力 　　·差别定量——二个或二个以上样本的miRNA簇表达的差异可定量分析 　　B.原理： 　　基于自有专利miRNA微孔板检测中，一个miRNA分子通过二个连接oligos与捕获ologo和生物素化的检测oligo连接，一个连接oligo与捕获oligo和待测的miRNA部分杂交，另一个连接oligo与检测oligo和待测的miRNA另一部分杂交，杂交体通过与固相化的捕获oligo杂交固者在微孔板上，再由辣根酶标记链酶亲和素和发光底物检测，这种杂交体结构对miRNA分子序列非常敏感，一个核苷酸的差异即会阻止杂交体的形成，从而可分辨同源miRNA，而Northern blot则很难鉴别同源miRNA，此外该方法的敏感性较Northern blot高。捕获的miRNAs进一步用辣根酶标记的亲和素检测，发光信号的强度用发光仪检测，miRNAs表达水平直接与发光度值成正比。