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  • 北京瑞金特生物科技有限公司
  • RNAi载体构建及筛选

    • 发布时间:
      2017-06-12 15:09:27
    • 供  应 商:
      北京瑞金特生物科技有限公司
    • 供应分类:
      CRO服务
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    • RNAi载体构建及筛选
    
                    

    实验原理

    早期的shRNA载体多采用RNA聚合酶III型启动子介导shRNA的表达,RNA聚合酶III型启动子如鼠源的U6启动子和人源的H1启动子可以在哺乳动物细胞中表达小分子RNA。随着miRNA干扰机制的深入研究,发展出第二代shRNA载体,即采用RNA聚合酶II型启动子CMV表达含侧翼序列的miRNA模拟物。该载体模拟miRNA的加工,表达出来的shRNA进入RISC沉默复合物的效率要比RNA聚合酶III型启动子表达的shRNA高数十倍,抑制效率更好,且可以和EGFP协同表达,方便观察转染效率。

    实验流程

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