单克隆抗体制备技术服务

简介：单克隆抗体（单抗）应用淋巴细胞杂交瘤技术将免疫动物的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，通过HAT筛选，ELISA抗体检测，有限稀释克隆化，选择出具有分泌抗体功能又能无限繁殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞，并产生抗体，就是单克隆抗体。单抗的最大优势是它的特异性、均一性、高效性和无限供应性。在免疫学、医学、生物学等领域的基础研究和临床医学上，包括对疾病(包括癌症)的诊断、预防和治疗等方面，均显示出巨大的生命力。
实验步骤：
1. 每种抗原免疫5只Balb/c小鼠
2. 选取ELISA效价较高的小鼠，取脾细胞与SP2/0细胞融合
3. 进行2~4次克隆化及ELISA筛选，确保杂交瘤细胞分泌抗体的稳定性
4. 抗体亚类鉴定
5. 至少选择2株杂交瘤细胞的冻存，并免费提供一年的保种服务

单抗制备标准流程：

抗体的应用：制备的抗体可能用于ELISA、WB、IHC、IP等实验。
客户需提供的材料及信息:

a.客户需要提供2mg以上的纯化蛋白质，纯度≥90%(SDS-PAGE检测)，若带融合标签需说明并提供筛选蛋白

b.如为多肽，客户要提供两种偶联不同蛋白质的多肽各4mg，未偶联多肽1mg，偶联多肽纯度≥85%

结果提供：实验报告 免疫前血清（20μl） 免疫后血清（20μl）

抗体上清（至少3株,1ml/株） 杂交瘤细胞（3株） 抗体亚型
如需要纯化的客户增加如下结果：
纯化抗体（3株）(纯度≥90％,浓度≥1mg/ml,每株5mg） 免疫效价 抗体亲和力常数

相关说明：
A、免疫原可以为重组蛋白、天然蛋白、合成多肽、偶联小分子等。
B、客户需要承诺外的细胞株。（联系我们老师）
C、客户需要对承诺外的细胞株抗体进行纯化。（联系我们老师）
D、如客户需要非IgG类的其他细胞株。（联系我们老师）