蛋白生物学实验----（原核）可溶蛋白表达服务

实验流程

1、基因优化:靶基因序列设计,密码子优化并合成目的基因。

2、载体-宿主系统优化:根据蛋白特性构建表达载体,转化质粒到高效表达的大肠杆菌中。

3、表达条件优化:对重组的大肠杆菌进行摇瓶培养,并通过SDS-PAGE电泳检测对表达条件(时间、温度、IPTG浓度)进行严格控制和优化。

4、纯化蛋白:对表达的蛋白采用亲和,离子或凝胶过滤层析等方法进行纯化。首选上清,次选蛋白复性。对实验用SDS-PAGE和Western Blot验证目标蛋白纯度正确性,按照客户要求进行分装或冻干。

须知

1、无污染的质粒,最小量不得低于100ng

2、原始质粒图谱及序列文件

3、插入基因后质粒的商业测序报告

4、目标蛋白质相关信息

5、最终蛋白一般保存在常规的缓冲液中(Tris-HCl,PBS)