一、应用
用于检测饮料及啤酒变质细菌,分析薄弱环节
NBB-增菌培养液(NBB-B -AM)系一种即开即用、便于操作的液体培养基,用于软饮料和酿酒业快速、安全检测饮料有害菌。用于分析灌装及生产现场中的薄弱环节,并用作进一步分析的增菌培养基。
二、操作
所需材料
无菌棉签
无菌棉签管(如有可能带可旋瓶盖);或无菌试管带有可旋盖或透气塞
试管夹子
实施
避免加热NBB- B -AM,因为这是一种对高温敏感的培养基。使用无菌棉签和带有可旋瓶盖或即用无菌棉签管需小心操作,请勿直接接触棉签及棉签棒。开启后,始终拿住带有无菌塑料薄片棉签,注意避免二次感染,直到棉签浸入NBB- B –AM培养基中,尽快将棉签置入培养基。
在生产区域,使用棉签检查饮料通路及接触区(瓶盖、泵、二氧化碳管线、旁路、罐内侧及其它)的薄弱环节。如果能彻底清除已检测出的污染,每隔3或6个月对这些区域做一次监控即可。
在灌装和包装区域,洗瓶机出瓶处、验瓶机,尤其是灌装机和封盖机直接及间接接触范围中的薄弱环节进行擦拭取样及检测。特别是灌装区中的星形轮、传输装置、齿轮及内表面,尤其是那些水多和接触产品的地方常常被看作是那些引起二次污染的微生物的生产环境和原因。
取样点可分为:
●洗瓶机头部
○特别是不同部位的冷凝水
●验瓶机
○星形轮
○输送带
○其他潮湿点
●灌装机
○灌装管
○控制阀
○进中罩
○提升装置
○进瓶螺杆
○星形轮表面
○星轮内侧
○挡板
○嵌板/梁
○塑料轨导板
●封盖机
○预压杆
○压盖头
○瓶盖进盖导轨及导板
○嵌板
○星轮
○输送带
根据经验发现至少每周在每条灌装线提取20~30棉签擦拭样进行检测,可以非常好的评价其卫生状况。
进行抹片检验后,在无菌试管中将棉签置入约10毫升的NBB- B –AM。注意棉签的长度应适合管长,以完全闭合管子。将试管置于夹子中,进行培养。
培养
厌氧条件下,培养棉签,最多3天,温度为27°C。
评价
在较严重污染及典型啤酒有害菌污染的情况下培养基中指示剂的颜色会由红变黄.
反应快速取决于多种因素(初始细胞数、细菌种类、在啤酒中的繁殖程度、物理状态和细菌来源),在较严重染菌的情况下一天的培养时间就足够,而在痕量污染或是污染了某些生长非常缓慢的微生物(如林特奈乳酸杆菌)时则通常需要基天的培养时间(见图一)。每日检查最终评价应在3天后进行。
用NBB- B –AM对罐装车间进行卫生状况检测,如果检测结果的阳性率连续几周低于20%,则可判断车间的卫生状况令人满意。更高或连续增长的阳性率表明检测区域存在有持续性生物膜,啤酒有害菌及其它的问题菌迟早会进入这样的生物膜中,逐渐适应环境继而开始生产和繁殖。此情况下,建议对灌装线进行大清洗(见图二)。如果随后阳性率结果仍很高,检查清洗程序的有效性,最佳检查办法是在清洗前及之后对一些关键点进行抹片检验,NBB-B–AM结果是阳性表示缺乏有效地清洗。
污染 微生物生活环境 擦拭面 | 微生物 | 棉签擦拭样品检测结果(NBB-B-AM颜色由红变黄),27℃ | 乳糖培养液LMC)(颜色由紫变黄),36~37℃ | ||
正常情况 |
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| 醋酸菌 弗拉特氏葡糖杆菌、液化醋化醋杆菌及其他无处一些无处不在的能分泌黏液的微生物(散在细胞) |
| 4~5天后 |
| 2天后 |
步骤一 | 醋酸菌膜(Acetan) 通常也能存在其它一些能分泌黏液的微生物(甘露聚糖、葡聚糖) |
| 3天后 |
| 2天后 |
步骤二 | 醋酸菌膜(生物膜) 持续性生物膜、黏液膜、英膜 |
| 2天后 |
| 2天后 |
步骤三 | 醋酸菌膜(生物膜) 持续性生物膜 酵母 乳酸菌 类大肠杆菌 |
| 1~2天后 产气 |
| 2天后 |
| !适应! |
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步骤四 | 醋酸菌膜(生物膜) 持续性生物膜 酵母 乳酸菌 果胶杆菌梳状菌属,巨球菌 类大肠杆菌和“潜在致病菌” |
| 1天后 产气 |
| 1~2天后 |
图一:啤酒有害菌的发展过程
阳性结果(%)
常规清洗 |
安全线 |
风险 |
不稳定卫生条件 |
周次
趋势线 阳性结果 |
图二:罐装车间每周卫生状况检测结果图
三、储藏与包装信息
储藏
储藏温度:4~8°C/40~45°F,依据产品规范。
存放于干燥、阴凉处。
废物处理
无危险物品。
无危害材料。
请遵循当地废物管理规定。
警示
请勿对培养基加热或冷冻,重复加热可能抑制其功能性。
操作热培养基时,一定佩戴保护装备。
不可将发酵试样瓶盖死,否则有可能发生爆炸。
相关产品信息:
产品名称 | 产品编号 | 包装规格 | 备注 |
NBB-Agar (NBB-A) | 2.04709.782 | 9 x 250 ml | Filtered beer, rinsing water, ambient & compressed air, CO2 |
NBB-Broth (NBB-B) | 2.04710.782 | 9 x 250 ml | Beer yeast, industrial hygiene (focus lactic acid bacteria) |
NBB-Broth Enrichment Medium (NBB-B-AM) | 2.04706.782 | 9 x 250 ml | Industrial hygiene check (focus indicator germs) |
NBB-Concentrate (NBB-C) | 2.04711.782 | 9 x 250 ml | Unfi ltered beer samples mainly, and also other beer samples |
NBB-Powder (NBB-P) | 2.04716.462 | 300 g/alubag | See NBB-Agar and -Broth |
NBB-B-Tubes | 2.04723.646 | Box (20 p.) | See NBB-Broth |
VLB S7S Agar (VLB) | 2.04785.244 | 9 x 250 ml | Filtered beer, rinsing water, ambient & compressed air, CO2 |
VLB S7S Broth (VLB) | 2.04786.782 | 9 x 250 ml | Beer yeast, industrial hygiene (focus lactic acid bacteria) |
Wort Agar (VLB) | 2.04787.244 | 9 x 250 ml | Filtered beer |
Lysine Agar (VLB) | 2.04789.244 | 4 x 250 ml | Unfi ltered beer, beer yeast |
Copper sulphate Agar (VLB) | 2.04790.244 | 4 x 250 ml | Unfi ltered beer, beer yeast |
Standard Agar (VLB) | 2.04792.244 | 4 x 250 ml | Filtered beer, water
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Sterile swabs | 2.04725.244 | 100 p./bag |
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