RACE（3\'和5\'-RACE）技术服务

 一、技术原理

RACE(rapid-amplification ofcDNA ends，RACE) 即cDNA末端快速扩增技术，是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段，通过向两端延伸扩增从而获得完整cDNA的5'和3'末端的有效方法，无需构建cDNA文库，即可在短时间内获得目的基因cDNA序列，具有简单、快速、廉价等优势，在cDNA文库的构建及筛选，新基因的发现等方面得到了广泛的应用。

 二、服务流程

1、3'-RACE的技术

利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为引物反转录mRNA，形成cDNA链，然后以cDNA为模板，基因特异引物GSP1（gene specific primer，GSP）作为上游引物，含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为下游引物，PCR扩增目的基因的3' 末端。

2、5'-RACE的技术

利用连有SMART寡核营酸序列通用接头引物的Oligo（dT）30MN作为引物和反转录酶MMLV反转录mRNA，形成cDNA。反转录时，利用该反转录酶具有的末端转移酶活性，在cDNA的5'末端自动加上3-5个（dC）残基，退火时（dC）残基与含有寡核苷酸序列Oligo（dG）的通用接头引物配对，进而转换为以SMART序列为模板继续延伸而连上通用接头.最后以含有部分接头序列的通用引物UPM（universal primer，UPM）作为上游引物，目的基因特异引物2（GSP 2 genespecific primer，GSP）作为下游引物， SMART第一链cDNA为模板，PCR扩增目的基因的5'末端。

三、服务内容

RNA提取、定量及反转录

RACE(3'和 5'-RACE)

结果分析及实验报告

四、实验报告内容

扩增片段的电泳图，含3'和 5'-RACE PCR片段的质粒载体及细菌一份；

全长cDNA序列及测序报告；

RACE实验步骤、使用仪器、引物序列等。

五、客户提供

组织或细胞等材料(不接受RNA样本，除非有足够证据证明您的RNA是高质量)；

尽可能多的背景资料，如已知序列、丰度、估计长度、种属同源情况等。

六、实验周期及收费标准

服务说明
1、如果您的样品为原核生物，我们无法保证序列为3'端或5'端全长。
2、由于mRNA存在个体和组织差异，PCR产物测序或许会有套峰存在，此种情况之下我们会提供2个克隆的测序结果，由客户最终确认其准确性。