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  • 泰克生物科技(天津)有限公司
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    重组片段抗体定制服务

    • 药智价格:
      询价
    • 发布时间:
      2023-10-17 15:01:35
    • 供  应 商:
      泰克生物科技(天津)有限公司
    • 供应分类:
      CRO服务
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    • 重组片段抗体定制服务
    
                    

    抗体/抗体片段抗原产生特异性和高效结合性,在生化、治疗和诊断等领域发挥不可替代的作用。传统生产单克隆抗体的杂交瘤技术,由于其自身研发周期比较长,生产的成本相对较高,已经成为大规模、快速生产抗体/抗体片段的瓶颈。近年来,随着基因重组和生物工程技术的不断进步,高通量筛选和大规模生产抗体/抗体片段成为现实。

    抗原结合片段 (Fab) 是抗体上与抗原结合的区域。 它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。 只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段(scFv),其大小只有Fab片段的一半,但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段,单域抗体,又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb,是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段,缺少常规的轻链和重链的CH结构域。

    泰克生物是一家专业的CRO服务提供商,能为我们的客户提供高质量的重组抗体表达服务,如scfv抗体片段、fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务。另外,泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心,能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。

     

     抗体片段特性

     

    重组片段抗体定制服务.jpg 

     

    抗体类型

    组分

    分子量(kDa)

    化合价

    半衰期(h)

    Fab

    VH+CH1+VL+CL

    (轻重链利用二硫键连接)

    50-55

    单体

    12-20

    scFv

    VH+VL

    30

    单体

    2-4

    sdAb

    VHH

    15

    单体

    0.5

    Fc融合抗体

    (抗体+CH2+CH3)*2

    /

    二聚体

    /

    di-scFv

    scFv*2

    60

    二聚体

    4-8


     抗体片段表达系统常用宿主

      

    表达系统

    菌株/细胞

    特点

    E.coli

    BL21(DE3)

    Ion-ompT,有效防止重组蛋白在胞内被水解

    Rosetta(DE3)菌株含有pRARE质粒,能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密码子的tRNA,能够提供更加“通用”的蛋白质表达,
    从而提升目的蛋白表达水平,该质粒具有氯霉素抗性。

    Rosetta

    哺乳动物细胞

    CHO-S

    是实验室常用的细胞系,作为贴壁和悬浮培养生长良好,生产率高,是大规模培养和GMP程序的理想选择;可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药,显示出卓越的生物相容性和药物活性;适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件,并具有更好的稳定性和安全性。

    CHO-K1

    Freestyle 293F

    是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系,可以高效表达蛋白。

    Expi 293F

    具有高度可转染行,展示出较高的蛋白表达水平,相比标准的悬浮适应293细胞,表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。


     抗体片段高表达策略


    优化方式

    特性

    融合抗体

    Fab 基因表达时,5'端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因,可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达,形成完整的立体折叠。Fab片段保持了亲本抗体的抗原结合特异性和生物学活性。Fd基因片段和L链基因可以分别构建在两个载体上,然后共转染细胞,也可以构建在一个载体上转染细胞进行表达。

    抗体序列本身的修饰

    经定点突变可以改变抗体在某些关键位点的氨基酸,从而优化其稳定性,增强与抗原的亲和性,提高表达产量。

    表达系统的选择

    应考虑的因素有:实验设备、需表达抗体毒性、所需营养物、是否需要抗体高产率、抗体纯化工艺、生产成本、调控元件、生物安全方面等。

    密码子优化

    天然抗体/scFv来源于真核生物,其密码子很可能不为E.coli所偏好,使用偏好密码子能提高细胞对环境及抗体的适应性,减少重组抗体的错误折叠率。

    条件优化

    需要考虑的因素包括温度、培养基配比、pH、培养时间及诱导条件等。


     抗体表达服务内容

     

    实验内容

    交付

    周期

    基因合成&载体构建

    1. 重组抗体

    2. 表达载体

    3. 克隆菌株

    4. 实验报告

    6-8周

    质粒抽提

    细胞转染&表达抗体

    抗体纯化(SDS-PAGE)


     泰克可提供的服务

     

    片段抗体构建和生产服务


    片段抗体包括Fab抗体、scFv和VHH抗体(驼源纳米抗体)等。客户可直接提供Fab、scFv或VHH序列,交由泰克生物进行重组表达并获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息,则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv、VHH等抗体。

     

    重组抗体293F/CHO细胞表达服务


    全套Gibco无血清哺乳细胞培养,适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求,如糖基化修饰,磷酸化修饰等。为客户提供的全套服务满足GMP-like体系,包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定,动物源成分的质控,标准化细胞培养与转化操作流程,全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。

     

     服务优势

     

     详细的实验设计和论证:包含稀有密码子分析,抗体序列分析,表达系统的选择,表达载体构建方案,抗体修饰等

     多种标记抗体表达:His标签融合表达,同位素标记表达、生物素标记表达

     多个种属的重组抗体制备:包括人源,鼠源,兔源,羊源,犬源,骆驼源,羊驼源,牛源等

     抗体修饰控制:糖基化修饰和磷酸化修饰多寡控制

     多重表达模式:稳定表达和瞬时表达

     配套的哺乳体系高表达载体和各种规格的放大体系

     低内毒素水平:LAL检测法<0.1EU/ug

     完整的文件追溯体系,保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯



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