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  • 泰克生物科技（天津）有限公司

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    重组片段抗体定制服务

    • 药智价格：
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    • 发布时间：
      2024-08-27 15:32:36
    • 供  应 商：
      泰克生物科技（天津）有限公司
    • 供应分类：
      CRO服务
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    • 重组片段抗体定制服务
    
                
    抗体/抗体片段抗原产生特异性和高效结合性，在生化、治疗和诊断等领域发挥不可替代的作用。传统生产单克隆抗体的杂交瘤技术，由于其自身研发周期比较长，生产的成本相对较高，已经成为大规模、快速生产抗体/抗体片段的瓶颈。近年来，随着基因重组和生物工程技术的不断进步，高通量筛选和大规模生产抗体/抗体片段成为现实。
    抗原结合片段 （Fab） 是抗体上与抗原结合的区域。 它包含每条重链和轻链的一个恒定区和一个可变区。 只有重链和轻链的可变区融合在一起形成单链可变片段（scFv），其大小只有Fab片段的一半，但保留了原有的特异性。另一种小抗体片段，单域抗体，又称域抗体、VHH、VNAR或sdAb，是一种由单个单体可变抗体结构域组成的抗体片段，缺少常规的轻链和重链的CH结构域。
    泰克生物是一家专业的CRO服务提供商，能为我们的客户提供高质量的重组抗体表达服务，如scfv抗体片段、fab抗体片段、sdAb单域抗体、重链抗体等重组抗体构建和表达服务。另外，泰克生物目前在建的5000平米的GMP研究中心，能够为各类工业客户提供批量的重组抗体生产服务。
     
    █ 抗体片段特性
     
    重组片段抗体定制服务.jpg 
     
    抗体类型
    组分
    分子量（kDa）
    化合价
    半衰期（h）
    Fab
    VH+CH1+VL+CL
    （轻重链利用二硫键连接）
    50-55
    单体
    12-20
    scFv
    VH+VL
    30
    单体
    2-4
    sdAb
    VHH
    15
    单体
    0.5
    Fc融合抗体
    （抗体+CH2+CH3）*2
    /
    二聚体
    /
    di-scFv
    scFv*2
    60
    二聚体
    4-8

    █ 抗体片段表达系统常用宿主
      
    表达系统
    菌株/细胞
    特点
    E.coli
    BL21（DE3）
    Ion-ompT，有效防止重组蛋白在胞内被水解

    Rosetta（DE3）菌株含有pRARE质粒，能够提供AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和GGA稀有密码子的tRNA，能够提供更加“通用”的蛋白质表达，    从而提升目的蛋白表达水平，该质粒具有氯霉素抗性。
    Rosetta
    哺乳动物细胞
    CHO-S
    是实验室常用的细胞系，作为贴壁和悬浮培养生长良好，生产率高，是大规模培养和GMP程序的理想选择；可进行许多翻译后修饰以获得生物仿制药，显示出卓越的生物相容性和药物活性；适用于无蛋白、无动物生产、无血清培养条件，并具有更好的稳定性和安全性。
    CHO-K1
    Freestyle 293F
    是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系，可以高效表达蛋白。
    Expi 293F
    具有高度可转染行，展示出较高的蛋白表达水平，相比标准的悬浮适应293细胞，表现出更快速的细胞生长和更高的培养存活率。

    █ 抗体片段高表达策略

    优化方式
    特性
    融合抗体
    Fab 基因表达时，5'端带上细菌蛋白信号肽基因的Fd基因和L链基因，可在大肠杆菌细胞壁的周质腔内分泌型表达，形成完整的立体折叠。Fab片段保持了亲本抗体的抗原结合特异性和生物学活性。Fd基因片段和L链基因可以分别构建在两个载体上，然后共转染细胞，也可以构建在一个载体上转染细胞进行表达。
    抗体序列本身的修饰
    经定点突变可以改变抗体在某些关键位点的氨基酸，从而优化其稳定性，增强与抗原的亲和性，提高表达产量。
    表达系统的选择
    应考虑的因素有：实验设备、需表达抗体毒性、所需营养物、是否需要抗体高产率、抗体纯化工艺、生产成本、调控元件、生物安全方面等。
    密码子优化
    天然抗体/scFv来源于真核生物,其密码子很可能不为E.coli所偏好，使用偏好密码子能提高细胞对环境及抗体的适应性,减少重组抗体的错误折叠率。
    条件优化
    需要考虑的因素包括温度、培养基配比、pH、培养时间及诱导条件等。

    █ 抗体表达服务内容
     
    实验内容
    交付
    周期
    基因合成＆载体构建
    1. 重组抗体
    2. 表达载体
    3. 克隆菌株
    4. 实验报告
    6-8周
    质粒抽提
    细胞转染＆表达抗体
    抗体纯化（SDS-PAGE）

    █ 泰克可提供的服务
     
    片段抗体构建和生产服务

    片段抗体包括Fab抗体、scFv和VHH抗体（驼源纳米抗体）等。客户可直接提供Fab、scFv或VHH序列，交由泰克生物进行重组表达并获得高纯度产品。如客户仅有靶抗原信息，则可委托泰克生物进行动物免疫并筛选scFv、VHH等抗体。
     
    重组抗体293F/CHO细胞表达服务

    全套Gibco无血清哺乳细胞培养，适用于科学家对天然构象蛋白的体外重组表达需求，如糖基化修饰，磷酸化修饰等。为客户提供的全套服务满足GMP-like体系，包括细胞种子库来源文件记录体系、细胞种子批检定，动物源成分的质控，标准化细胞培养与转化操作流程，全套GE提供的纯化填料和设备等准则进行生产的重组蛋白。
     
    █ 服务优势
     
    ✔ 详细的实验设计和论证：包含稀有密码子分析，抗体序列分析，表达系统的选择，表达载体构建方案，抗体修饰等
    ✔ 多种标记抗体表达：His标签融合表达，同位素标记表达、生物素标记表达
    ✔ 多个种属的重组抗体制备：包括人源，鼠源，兔源，羊源，犬源，骆驼源，羊驼源，牛源等
    ✔ 抗体修饰控制：糖基化修饰和磷酸化修饰多寡控制
    ✔ 多重表达模式：稳定表达和瞬时表达
    ✔ 配套的哺乳体系高表达载体和各种规格的放大体系
    ✔ 低内毒素水平：LAL检测法<0.1EU/ug
    ✔ 完整的文件追溯体系，保证您的产品所有材料、试剂和制备信息可追溯


    
            
    

            
    
                
    
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