笃玛 绵羊S100钙结合蛋白B (S100B) ELISA 试剂盒 说明书

绵羊S100钙结合蛋白B (S100B) ELISA 试剂盒

ELISA试剂盒常见问题解析：

1. 加样量不一致？

   解决方法：样品稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。

  2.样品数量多少不一，加样时间有长有短？

   解决方法：重复某一样品时，加样时间尽可能与第一次接近。

 3.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致？

   解决方法：重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。

绵羊S100钙结合蛋白B (S100B) ELISA 试剂盒

酶联免疫吸附剂测定可用于测定抗原，也可用于测定抗体。在这种测定方法中有3种必要的试剂：
①固相的抗原或抗体，②酶标记的抗原或抗体，③酶作用的底物。根据试剂的来源和标本的性状以及检测的具备条件，可设计出各种不同类型的检测方法。

绵羊S100钙结合蛋白B (S100B) ELISA 试剂盒

Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法  

 1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂，严格按照试剂说明书进行操作，操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。    

2 加样 可能原因：

 1）血清或血浆标本分离不好即进行加样；

 2）手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)；

 3）加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。

解决办法：

1） 标本为血清：将血液先自然存放1-2小时后，再用3000rmp离心15分钟；标本为血浆：必须使用含抗凝剂的血液标本收集管，采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次，放置一段时间后，3000rpm离心15分钟；若在几天内检测，可放在2-8℃冰箱中，若要贮存，则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。

 3) 加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

4) 如果采用AT或其他全自动加样，最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。

5) 标本较多时，请分批操作。    

3 孵育 可能原因：

1) 孵育时未贴封片或加盖，使标本或稀释液蒸发，吸附于孔壁，难于清洗彻底；

2) 孵育时间人为延长，导致非特异性结合紧附于反应孔周围，难以清洗彻底。

解决办法：

1) 贴封片或加盖；

2) 按说明步骤严格控制操作时间。  

 4 洗板 可能原因：

1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。

 2) 采用半自动洗板机洗板时，洗液量不足，导致洗板不彻底；洗板针堵塞，抽吸不完全；洗板不畅，导致洗板效果差。

 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。

解决办法：

 1) 保证洗液注满各孔，洗板针畅通，洗完板后最好在吸水纸（选择干净、无或少尘的吸水材料）上轻轻拍干；

 2) 合理安排，或多用几台洗板机。  

  5 显色 可能原因：

1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；

 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。

解决办法：

1) 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；

 2) 加样时保持显色剂不外流；

 3) A、B液应避免接触金属器械。  

 6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡，导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡

7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。 在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸；尽可能实现ELISA检测标准自动化，有效提高检测质量。在实际操作中，除了选择优良试剂外，必须严格按照操作步骤进行操作，同时做好室内质控、室间质评，以严谨的工作作风检测每一份标本，才能保证检测质量。