北京诺博莱德科技有限公司供应RNA病毒基因组提取试剂盒 NobleRyder R0903;现货供应RNA病毒基因组提取试剂盒 NobleRyder R0903量大优惠
RNA/DNA病毒基因组提取试剂盒
试剂盒组成
50T
100T
保存温度
蛋白酶K(10mg/ml)
1ml
2ml
-20℃
结合液
25ml
50ml
RT
漂洗液(RNase free)
15ml
15ml×2
2-8℃
玻璃奶
1.25ml
2.5ml
2-8℃
洗脱缓冲液(RNase free)
10ml
10ml
2-8℃
原理简介
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因组,也可用于DNA病毒基因组的提取。本试剂盒利用蛋白酶K破开病毒外壳,放出RNA/DNA,用玻璃奶吸附达到纯化目的。
使用本试剂盒提取的RNA/DNA可用于各种常规操作,包括RT-PCR、文库构建、Southern杂交等实验。
注意事项
1.一般病毒含量过低,最后提取的基因组RNA/DNA电泳无法检测到,但RT-PCR/PCR等其他实验还会有结果。
2.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。
3. 所有离心步骤最好用低温离心机在4℃条件下离心,如果实验室没有低温离心机,也可以使用常温离心机,但所提得的RNA可能会降解严重些。
操作步骤
准备工作:使用前请先开启一瓶新的无水乙醇,倒入漂洗液中,倒满至离瓶口约0.5-1ml,盖上瓶口,摇匀。
1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm离心5min,尽量取上清使用,弃去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混匀,65℃消化10-20min,期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 向管中加入500ul结合液,充分混匀。
4.玻璃奶摇匀。加入25ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟,加入30-50ul洗脱缓冲液混匀溶解,静置5分钟。离心,取上清为所提RNA。
北京诺博莱德科技有限公司位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz,Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。