CCK-8 细胞增殖/毒性检测试剂盒

产品简介:

CCK-8 kit是含有WST-8（化学名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑单钠盐）化合物，用于细胞增殖检测的一类检测试剂盒。它的作用原理类似于MTT，在电子耦合试剂作用下被细胞线粒体中的一些脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲臜（（Formazan）。细胞增殖越快，生成的Formazan越多，则颜色就越深。用酶标仪在450nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。CCK-8 Kit方法已被广泛应用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的抗肿瘤药物筛选和细胞增殖试验等。

CCK8法与其他细胞增殖/毒性检测方法的优势比较

保存条件:

避光-20℃保存，两年有效；-4℃保存，一年有效。

活力计算:

细胞活力*（％）=[A(加药)-A（空白）]/[A（0加药）-A（空白）] ×100

A（加药）：具有细胞、CCK8溶液和药物溶液的孔的吸光度

A（空白）：具有培养基和CCK8溶液而没有细胞的孔的吸光度

A（0加药）：具有细胞、CCK8溶液而没有药物溶液的孔的吸光度

*细胞活力：细胞增殖活力或细胞毒性活力

注意事项:

1.   初次实验前，应对接种细胞数量和孵育时间进行摸索，找出最佳细胞数量和孵育时间。

2.    细胞接种均匀，培养板边孔的水分容易蒸发，因此只加PBS或培养基，以减少实验误差。

3.   检测主要依赖脱氢酶催化反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，可在加CCK之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。

4.   如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490 nm之间的滤光片，但是450nm滤光片的检测灵敏度最高。