一、产品概要:孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体,又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿,
其既是杀真菌剂,又是染料,易溶于水,溶液呈蓝绿色。长期以来,渔民都用它
来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等,而且为了使鳞受损的鱼延长生命,在
运输过程中和存放池内,也常使用孔雀石绿。研究显示,孔雀石绿在鱼内残留时
间很长,且其具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用,鉴于此,许
多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。我国于2002年5月也将孔雀石绿列
入《食品动物禁用的兽药及其化合物清单》中。目前检测孔雀石绿的方法有两种:
HPLC或GC-MS,但是其前处理步骤繁琐,费用昂贵。本试剂盒采用竞争酶标免
疫法,可经济、快速地检测鱼、虾等样品中的孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫
等残留。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操
作误差和工作强度。
二、试验原理:本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被孔雀石绿抗原,样
品残留的孔雀石绿和微孔条上预包被的抗原共同竞争抗孔雀石绿抗体,加入酶标
二抗后,经TMB底物显色,样品吸光度值与其残留物孔雀石绿呈负相关,与标准
曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中孔雀石绿的含量。
三、交叉反应率:显性孔雀石绿 ……………………………………………100%
隐性孔雀石绿(氧化后)………………………………100%
结晶紫 ……………………………………………………150%
隐性结晶紫 ………………………………………………150%
四、包装组成:酶标板、孔雀石绿显性高浓度标准品、孔雀石绿隐性高浓度标准品、孔雀石绿
酶标物、孔雀石绿抗试剂、底物液A液、底物液B液、终止液、氧化剂、浓缩洗
涤液、孔雀石绿浓缩标/样品稀释液
五、样品处理:(一)鱼/虾:均质、加组织提取液、振荡、离心、加氧化剂液、静置、氮气
吹干、加样品稀释液、加正己烷、涡动、离心、取样用于检测;
(二)水样:取样、离心、取上清液、加孔雀石绿标品稀释液、混匀后取样进
行检测;
六、操作步骤:1、将所需试剂回温;2、取微孔板;3、洗涤工作液在使用前也需回温;
4、将样本和标准品对应微孔按序编号;5 加标准品/样品;6、洗板;
7、加酶标物;8、显色;9、测定;
七、 结果判定:定量分析
八、方法灵敏度、准确度、精密度: 试剂盒灵敏度:0.1ppb
样品最低检测限:鱼虾………………………………………………………1ppb
水样………………………………………………………1ppb
回收率:鱼虾……………………………………………80±15%
水样……………………………………………80±15%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
九、贮藏条件及保存期: 贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期:该产品有效期为12个月。