一、产品概要:己烯雌酚(Diethylstibestrol, DES)是一种人工合成的雌激素,在促进动物蛋白质
的合成代谢、提高动物日增重和减少脂肪等方面效果明显,因此一直被作为一种
动物生长促进剂用于畜禽以及水产品养殖中。国际癌症研究机构(IARC)研究发现,
DES是一种致癌物质,能够在动物源性食品如肝 脏、肌肉、蛋、奶中残留,并通
过食物链危害人体健康。因此世界各国规定食品动物养殖中不得以任何途径和方
式使用DES养殖动物及动物性食品中不得检出 DES。 本试剂盒是应用ELISA
技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理:本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被己烯雌酚抗原,
样品残留的己烯雌酚和微孔条上预包被的抗原共同竞争抗己烯雌酚抗体,加入酶
标二抗后,经TMB底物显色,样品吸光度值与其残留物己烯雌酚呈负相关,与标
准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中己烯雌酚的含量。
三、交叉反应率:己烯雌酚…………………………………………………100%
四、包装组成:酶标板、己烯雌酚高浓度标准品、己烯雌酚抗试剂、己烯雌酚酶标物、底物液
A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、己烯雌酚浓缩标准品稀释液
五、样品处理:(一)动物组织:匀浆、取样、加乙腈--丙酮提取液、振荡、离心、取上清液
氮气吹干、加二氯甲烷、加氢氧化钠溶液、混匀、离心、取上清液、
调pH值、取样、加样品稀释液混匀、取样用于分析;
(二)饲料:取样、加盐酸溶液、加入乙腈、振荡、离心、取上清液、加氢氧
化钠溶液调pH、加二氯甲烷、离心、氮气吹干、 加二氯甲烷、加氢氧
化钠溶液、离心、取上清液、加磷酸溶液调pH值并充分混匀、加样品
稀释、混匀、取样用于分析;
(三)奶粉:取样、加盐酸溶液、加乙腈、振荡、离心、取上清液、加氢氧
化钠溶液调pH值并充分混匀、加二氯甲烷、混匀、离心、氮气吹干、
加二氯甲烷、加氢氧化钠溶液、离心、取上清液、加磷酸溶液调pH值
并充分混匀、加样品稀释液中、混匀、取样用于分析;
(四)牛奶:取样、加乙腈、振荡、离心、取上清液加入去离子水、加三氯甲烷、
离心、氮气吹干、加二氯甲烷、加氢氧化钠溶液、离心、取上清液、加磷
酸溶液调pH值并充分混匀、加样品稀释液、混匀、取样用于分析;
六、操作步骤:1、将所需试剂回温;2、取需要数量的微孔板;3、洗涤工作液在使用前也需
回温;4、将样品和标准品对应微孔按序编号;5 加标准品/样品;6、洗板;
7、加酶标物;8、显色;9、测定;
七、结果判定:粗略判定:用样品的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
八、检测方法灵敏度、准确度、精密度: 试剂盒灵敏度:0.1ppb
样品最低检测限:动物组织…………………………………………………1ppb
饲料………………………………………………………5ppb
奶粉………………………………………………………1ppb
牛奶………………………………………………………1ppb
回收率:组织样品…………………………………………………85±20%
饲料………………………………………………………90±10%
牛奶…………………………………………………80±10%
奶粉……………………………………………85±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
九、贮藏条件及保存期:贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。
保存期: 该产品有效期为3个月。