一、产品概要:
沙丁胺醇(Salbutamol ,SAL) 属于β-2兴奋剂的一种。β-2兴奋剂中最常作为促生长剂使用的是克伦特罗(Clenbuterol ,CL),但随着对CL 检测力度的加大,非法使用者开始转向其他替代品。由于SAL与CL 的促生长作用相差不大,其在动物体内的消除时间比克伦特罗短,毒性较弱。因此,SAL 就成为CL之后最主要的替代品。将SAL 作为饲料添加剂使用,能显著促进动物生长、增加饲料转化率和瘦肉率,长期超量使用,则会在动物组织中蓄积,人食用了这种动物产品后会引发中毒。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理:
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被沙丁胺醇抗原,样本 中残留的沙丁胺醇和微孔条上预包被的抗原共同竞争抗沙丁胺醇抗体,加入酶标二抗后,经TMB底物显色,样本的吸光度值与其残留物沙丁胺醇的含量呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样本中沙丁胺醇的含量。
三、交叉反应率:
沙丁胺醇…………………………………100%
多巴酚丁胺………………………………小于1%
盐酸多巴胺………………………………小于1%
克仑特罗…………………………………小于1%
四、包装组成:
酶标板、标准品、高浓度标准品、沙丁胺醇抗试剂、沙丁胺醇酶标物、底物液A液、 底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、沙丁胺醇浓缩样品稀释液
五、样品处理:
(一)动物组织:方法一:取匀浆样品、加提取液并振荡混匀、离心、取上清调pH值、离心、取上清液用于分析;方法二:取匀浆样品、加乙腈、振荡混匀、离心、氮气吹干、加样品稀释液和正己烷、振荡摇匀、离心、取下层液体用于分析;
(二)饲料:取样、加HCl溶液、涡动、离心、取上清液、调pH值、离心、取上清加稀样品稀释液并混匀、取样用于分析;
(三)尿样前处理方法:方法一:取样加入去离子水并充分混匀、取稀释后的尿样用于分析。方法二:取样、加碳酸盐缓冲液并充分摇匀、加异丁醇-乙酸乙酯混合液并充分混匀、离心、氮气吹干、加入稀释后的样品稀释液并充分振荡摇匀、取样用于分析;
六、检测步骤:
1.取出所需试剂平衡 2.取出需要数量的微孔板 3.洗涤工作液在使用前也需回温 4.编号
七、 结果判定:
粗略判定:用样品的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
八、检测方法灵敏度、准确度、精密度:
试剂盒灵敏度:0.2ppb
样品最低检测限:动物组织(方法1)---0.8ppb
动物组织(方法2)---0.4ppb
饲料样本---20ppb
尿液样本(方法1)---0.6ppb
尿液样本(方法2)---0.5ppb
回收率:动物组织(方法1)---80±15%
动物组织(方法2)---80±10%
饲料样本---80±10%
尿液样本(方法1)---80±15%
尿液样本(方法2)---80±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
九、贮藏条件及保存期:
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃;
保存期:该产品有效期为12个月。