一、产品概要:
金霉素(Chlortetracycline,CTC)是一种高效广谱抗生素,对多种病原菌有较强的抑制作用,常用于动物各种传染性疾病的治疗。但其在动物肉、奶、蛋等食品中的残留严重威胁人体健康,能引起再生障碍性贫血和粒状白细胞缺乏症等疾病,低浓度的药物残留还会诱发致病菌的耐药性。
高效液相色谱法目前是分析金霉素残留量的主要方法,但需要一系列繁琐的提取和净化处理步骤,而且存在回收率低,杂质干扰大等问题。
本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理:
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被金霉素类药物抗原,样本残留的金霉素药物和微孔条上预包被的抗原竞争抗金霉素药物抗体,加入酶标二抗,经TMB底物显色,样本吸光度值与其残留物金霉素药物呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中金霉素药物的含量。
三、适用范围:
可定性、定量检测,本试剂盒适用于蜂蜜、牛奶、组织(含水产)中金霉素药物的残留检测。
四、交叉反应率:
金霉素…………………………………………………100%
五、包装组成:
酶标板、标准品工作液(6瓶)、金霉素酶标物、金霉素抗试剂、底物液A液、底物液B液、终止液、金霉素浓缩样品提取液、浓缩洗涤液、金霉素浓缩样品稀释液
六、样本处理:
蜂蜜:
匀质、加蜂蜜样本稀释液、漩涡混合、离心、取上清、加洗涤工作液、涡旋混合、分析;
牛奶:
取样、加水、涡旋混合、稀释、分析;
组织:
取样、加样品提取液、漩涡混合、离心、取上清、加正己烷、涡旋混合、离心、取下清、震荡混匀、加样品稀释液后混匀、分析;
水样:
取样、加样品稀释液、混匀、分析
鸡蛋:
取样、加样品提取液、漩涡混合、离心、取上清、加正己烷、涡旋混合、离心、取下清、震荡混匀、离心混合、分析。
七、检测步骤:
1、将所需试剂回温;
2、取需要数量的微孔板;
3、洗涤工作液在使用前也需回温;
4、将样本和标准品对应微孔按序编号;
5、加标准品/样本;
6、洗板;
7、加酶标物;
8、显色;
9、测定。
八、 结果判定:
粗略判定:用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
九、检测方法灵敏度、准确度、精密度:
试剂盒灵敏度:0.02ppb
样本最低检测限:
蜂蜜………………………………………………………0.4ppb
牛奶………………………………………………………0.8ppb
组织(含水产)、鸡蛋………………………………………1.2ppb
水样………………………………………………………0.2ppb
回收率:
蜂蜜、牛奶……………………………………………… 90±10%
组织(含水产)、鸡蛋…………………………………90±15%
水样……………………………………………………80±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
十、贮藏条件及保存期:
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃;保存期:该产品有效期为12个月。