一、产品概要:
庆大霉素(Gentamicin, GEN)属于氨基糖甙类抗生素,主要作用于革兰氏阴性细菌,由于其抗菌谱广、疗效佳且价格低廉而广泛应用于兽医临床和动物饲料添加剂。但GEN的血清有效浓度与毒性浓度很相近,安全范围较小,在其应用过程中易产生毒副作用,尤其大剂量不规范使用,易导致动物性食品中GEN残留超标,对人体健康构成危害,对脑神经、听觉以及肾脏的损害严重。现有的检测庆大霉素方法如色谱法或色谱-质谱联用技术其样品前处理复杂、所需仪器昂贵、操作复杂、耗费时间。而使用庆大霉素ELISA试剂盒能够既快速又准确的分析样品中庆大霉素残留。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,操作时间短于50min,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理:
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被庆大霉素抗原,样品残留的庆大霉素和微孔条上预包被的抗原竞争抗庆大霉素抗体,加入酶标二抗后,经TMB底物显色,样品吸光值与其残留物庆大霉素成负相关,与标准 曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中庆大霉素的含量。
三、适用范围:可定性、定量检测牛奶、动物及水产组织等样品中庆大霉素的残留量。
四、交叉反应率:
庆大霉素……………………………………………………100%
五、包装组成:
酶标板、标准品(5瓶)、高浓度标准品、庆大霉素抗试剂、庆大霉素酶标物、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、庆大霉素浓缩样品稀释液
六、样品处理:
(一)动物及水产组织(鸡肉、鸡肝、猪肉、猪肝、鱼、虾等):匀浆、加三氯乙酸、涡动、离心、稀释、取样分析;
(二)牛奶:取样、加三氯乙酸、涡动、离心、调节PH值、离心、稀释、取样分析;
七、操作步骤:
1、将所需试剂回温;
2、取需要数量的微孔板;
3、洗涤工作液在使用前也需回温;
4、将样本和标准品对应微孔按序编号;
5、加标准品/样本;
6、洗板;
7、加酶标物;
8、显色;
9、测定。
八、结果判定:
粗略判定:用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
九、检测方法灵敏度、准确度、精密度:
试剂盒灵敏度:0.2ppb
样品最低检测限:
组织……………………………………………………2ppb
牛奶……………………………………………………0.5ppb
回收率:
组织…………………………………………………70±10%
牛奶…………………………………………………90±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
十、贮藏条件及保存期:
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃。保存期: 该产品有效期为12个月。