一、产品概要:
四环素类药物(Tetracyclines,TCs)是以四并苯为母核的一族抗生素,其中四环素、土霉素、金霉素及多西环素以其优良的抗菌性、稳定的药性及低廉的价格,在畜牧业生产中广泛用于疾病的治疗和预防及促进生长。但该类药物过量使用会导致畜产品中高浓度药物残留,直接影响消费者身体健康。高效液相色谱法目前是分析四环素类药物残留量的主要方法,但需要一系列繁琐的提取和净化处理步骤,而且存在回收率低,杂质干扰大等问题。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理:
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被四环素类药物抗原,样本残留的四环素类药物和微孔条上预包被的抗原竞争抗四环素类药物抗体,加入酶标二抗,经TMB底物显色,样本吸光度值与其残留物四环素类药物呈负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中四环素类药物的含量。
三、适用范围:
可定性、定量检测,本试剂盒适用于蜂蜜、牛奶、组织(含水产)、鸡蛋中四环素、土霉素、金霉素、强力霉素等四环素类药物的残留检测。
四、交叉反应率:
四环素…………………………………………………100%
强力霉素…………………………………………………170%
金霉素……………………………………………………230%
土霉素……………………………………………………250%
五、包装组成:
酶标板、高浓度标准品(6瓶)、四环素类酶标物、四环素类抗试剂、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩样品提取液、浓缩洗涤液、四环素浓缩样品稀释液
六、样本处理:
(一)蜂蜜:均质样品、加样品提取液、漩涡、离心、加样品稀释液、涡流、取样分析;
(二)牛奶:取样、加样品提取液、涡流、加样品稀释液、涡流、加样品稀释液 、涡流、离心、取样分析;
(三)组织(含水产):均质样品、加样品提取液、漩涡、离心、加正己烷、涡流、加样品稀释液、涡流、取样分析;
(四)水样:样品稀释、混匀、取样分析。
(五)鸡蛋:均质样品、加样品提取液、漩涡、离心、加正己烷、涡流、加样品稀释液、涡流、取样分析;
七、检测步骤:
1、将所需试剂回温;
2、取需要数量的微孔板;
3、洗涤工作液在使用前也需回温;
4、将样本和标准品对应微孔按序编号;
5、加标准品/样本;
6、洗板;
7、加酶标物;
8、显色;
9、测定。
八、 结果判定:
粗略判定:用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
九、检测方法灵敏度、准确度、精密度:
试剂盒灵敏度:0.05ppb
样本最低检测限:
蜂蜜………………………………………………………1ppb
牛奶………………………………………………………2ppb
组织(含水产)、鸡蛋………………………………………3ppb
水样………………………………………………………0.5ppb
回收率:
蜂蜜、牛奶……………………………………………… 90±10%
组织(含水产)、鸡蛋…………………………………90±15%
水样……………………………………………………80±10%
精密度:试剂盒的变异系数均小于10%
十、贮藏条件及保存期:
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃;保存期:该产品有效期为12个月。