一、产品概要:
玉米赤霉烯酮(ZearaLenone,ZEN)又称F-2 毒素,主要成分为禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌等产生的2,4-二羟基苯甲酸内酯类化合物。ZEN 主要污染玉米、麦类、谷物等作物,具有很强的雌性激素作用,可引起猪、大鼠、小鼠、家禽等动物的雌激素过多症和严重的生殖道症状及不孕症,还具有免疫毒性、基因毒性等,对人也有雌激素作用。玉米赤霉烯酮一般用薄层色谱、高效液相色谱法检测, 但因其操作繁杂、费用昂贵而影响实际应用。而使用玉米赤霉烯酮ELISA试剂盒则能够快速而准确的分析样本中玉米赤霉烯酮的含量。本试剂盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,操作时间低于20min能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、交叉反应率:
玉米赤霉烯酮---------------------------------100%;
玉米赤霉酮------------------------------------13%;
玉米赤霉醇------------------------------------<1%
三、包装组成:
酶标板、标准品×5瓶、ZEN酶标物、ZEN抗试剂、底物液、终止液、浓缩洗涤液
四、样品处理:
(一)玉米、小麦等饲料原料及饲料样本处理方法:
1、粉碎并称取5g有代表性的样本置入100mL具塞三角瓶中,加入60%甲醇50mL与其混合;
2、于振荡器上剧烈振荡10min,转速为150r/min;(手摇或者涡旋均需5min以上);
3、取液体于4000r/min离心5min(或静置3min,再用定量滤纸过滤);
4、取上清或滤液0.5mL,再加入4.5mL去离子水;
5、振荡5S或手摇匀, 取50μL进行分析。
样本稀释倍数:1倍
(二)喷浆玉米皮、玉米胚芽粕等玉米副产物样本处理方法
1、粉碎并取5g有代表性的样本置入100mL具塞三角瓶中,加入90%甲醇50mL与其混合;
2、于振荡器上剧烈振荡10min,转速为150r/min;(手摇或者涡旋均需5min以上);
3、取液体于4000r/min离心5min(或静置3min,再用定量滤纸过滤);
4、取上清或滤液0.5mL,再加入4.5mL去离子水,振荡5s或手摇匀(稀释后的液体pH值应保证在6~8之间,可用1M“NaOH”或“HCL”进行调节)。
5、取50μL进行分析。
样本稀释倍数:1倍
五、操作步骤:
1、置于室温(20~25℃)平衡1h以上,注意每种液体试剂使用前均须摇匀。;
2、取出微孔板,将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8℃,不要冷冻;
3、洗涤工作液在使用前回温。
4、将样本和标准品对应微孔按序编号(在一次实验过程中,标准品和样本的总量不能超过24个,即不能超过6个检测条);
5、加标准品/样本(加抗试剂时请使用八道移液器);
6、洗板;
7、显色;
8、测定
六、 结果判定:
粗略判定:用样本的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围;
定量判定:定量分析
七、检测方法灵敏度、准确度、精密度:
检测限:
玉米、小麦、饲料及饲料原料……………………50μg/kg
回收率:
玉米、小麦、饲料………………………………90%±10%
玉米副产品………………………………………95%±15%
精密度:
试剂盒的变异系数均小于10%
八、贮藏条件及保存期:
贮藏条件:保存试剂盒于2~8℃;保存期:该产品有效期为12个月。