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  • 上海笃玛生物科技有限公司
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    笃玛 牛白细胞抗原B27(HLA-B27) ELISA 试剂盒 产品信息

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      1
    • 发布时间:
      2018-11-12 10:31:11
    • 供  应 商:
      上海笃玛生物科技有限公司
    • 供应分类:
      其他
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    笃玛 牛白细胞抗原B27(HLA-B27) ELISA 试剂盒  产品信息

    洗板方法
    手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲

    液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。
    自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。

    笃玛 牛白细胞抗原B27(HLA-B27) ELISA 试剂盒  产品信息

    Elisa试验操作中可能影响结果的原因及其相应的解决办法
        1 选择试剂 选择质量优良的检测试剂,严格按照试剂说明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡至少30分钟。
        2 加样 可能原因: 1)血清或血浆标本分离不好即进行加样; 2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特

    别是室内温度较高时); 3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法: 1) 标本为血清:将血液先自然存放1-2小时后,再用

    3000rmp离心15分钟;标本为血浆:必须使用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后必须立即颠倒采血管混合5-10次,放置一段时间后,

    3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要贮存,则置于-20℃的低温冰箱内。 2) 加样后及时放入孵箱。 3) 加

    酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 4) 如果采用AT或其他全自动加样,最好选择FAME或其他后处理仪器加酶试剂。 5) 标本较多

    时,请分批操作。
        3 孵育 可能原因: 1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗彻底; 2) 孵育时间人为延长,导致

    非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。解决办法: 1) 贴封片或加盖; 2) 按说明步骤严格控制操作时间。
        4 洗板 可能原因: 1) 采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2) 采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针

    堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。 3) 反应板过多造成洗板等待时间长。 解决办法: 1) 保证洗液注满各孔,洗板针畅

    通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干; 2) 合理安排,或多用几台洗板机。
        5 显色 可能原因: 1) 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 2) 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法: 1) 显

    色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2) 加样时保持显色剂不外流; 3) A、B液应避免接

    触金属器械。
        6 终止 可能原因如加终止液时产生较多气泡,导致假阳性增加。所以在加终止液时应避免产生气泡。
    7 读板 如读板时板底不清洁等。应保证酶标板清洁。
    在整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸;尽可能实现ELISA检测标准自动化,有效提高检测质量。在实际操作中,除了选择优良试剂

    外,必须严格按照操作步骤进行操作,同时做好室内质控、室间质评,以严谨的工作作风检测每一份标本,才能保证检测质量。

    笃玛 牛白细胞抗原B27(HLA-B27) ELISA 试剂盒  产品信息




    操作步骤
    1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3.  样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
    4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒

    温箱温育60min。
    5.  弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
        

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