笃玛 牛补体因子4 (C4) ELISA 试剂盒 产品介绍

笃玛  牛补体因子4 (C4) ELISA 试剂盒  产品介绍

样品测定

1． 移取xx微升 去干扰液（Reagent C）到上述待测样品或标准样品管里，混匀
2． 加入xx微升 反应液（Reagent D）
3． 加入xx微升 显色液（Reagent E），混匀
4． 室温下孵育20分钟
5． 放进微型台式离心机离心3分钟，速度为5000g
6． 移取1毫升上清液到比色皿
7． 即刻放进分光光度仪检测，获得待测样品和标准样品读数


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样品准备

1． 手术取出动物组织，并秤重以确定200毫克组织重量 
2． （选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管
3． （选择步骤）加入xx毫升 清理液（Reagent A）清洗1次
4． 即刻用刀片切碎组织
5． 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6． 加入预冷的xx毫升 清理液（Reagent A）
7． 涡旋震荡5秒，充分混匀
8． 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器，在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约40至80下）
9． 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管
10． 放进4℃台式离心机离心10分钟，速度为10000g
11． 移取500微升到新的1.5毫升离心管
12． 加入xx微升 稳定液（Reagent B），混匀
13． 放在冰槽里待测（注意：须1周内使用）
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标本要求
1. 血清：
室温血液自然凝固10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保
存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
2. 血浆：
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20
分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成应再次离心。
3.尿液：
用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀
形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
4.细胞培养上清：
检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。
5.培养细胞:
检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。
通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左
右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
6.组织标本:
切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化
后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀
浆器将标本匀浆化。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检
测，其余冷冻备用。
7.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进
行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融
8.不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。