紫花前胡苷
样品准备
1. 手术取出动物组织,并秤重以确定200毫克组织重量
2. (选择步骤)放进预冷的15毫升锥形离心管
3. (选择步骤)加入xx毫升 清理液(Reagent A)清洗1次
4. 即刻用刀片切碎组织
5. 放进一个预冷的15毫升锥形离心管
6. 加入预冷的xx毫升 清理液(Reagent A)
7. 涡旋震荡5秒,充分混匀
8. 即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器,在冰槽里用匀浆棒匀化组织(约40至80下)
9. 将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管
10. 放进4℃台式离心机离心10分钟,速度为10000g
11. 移取500微升到新的1.5毫升离心管
12. 加入xx微升 稳定液(Reagent B),混匀
13. 放在冰槽里待测(注意:须1周内使用)
紫花前胡苷
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
紫花前胡苷
注意事项
1. 当混合蛋白溶液时应尽量轻缓,避免起泡。
2. 洗涤过程非常重要,不充分的洗涤易造成假阳性。
3. 一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
5. 如标本中待测物质含量过高,请先稀释后再测定,计算时请最后乘以稀释倍数。
6. 在配制标准品、检测溶液工作液时,请以相应的稀释液配制,不能混淆。
7. 底物请避光保存。
8. 不要用其它生产厂家的试剂替换试剂盒中的试剂。