HaloTag®蛋白纯化系统

Cat.# G6280 体系为100ml，含有的HaloLinkTM 树脂、TEV 蛋白酶和HisLinkTM 树脂悬浮液，占总体积的25%。Cat.# G6270 体系为10ml，含有的HaloLinkTM 树脂、TEV 蛋白酶和HisLink^™ 树脂悬浮液，占总体积的25%。对于批量订购（如大于100ml）HaloLinkTM 树脂的客户，我们提供有竞争力的价格。请询价。

组分列表说明 HaloTag® Protein Purification System (HaloTag®蛋白纯化系统)被设计用于纯化HaloTag® 融合蛋白，HaloTag® 是一种新型蛋白标签，能够增强重组蛋白的表达产率和可溶性。HaloTag® 技术能够将目的蛋白以共价结合的形式、高效并特异地捕获到HaloLink™ 树脂上，因此克服了其它使用亲和标签进行蛋白纯化的方法所带来的、基于平衡反应的限制因素( 例如，低水平表达蛋白的低效捕获和冲洗纯化树脂导致的蛋白流失)。可利用HaloTag® 技术快速、方便地检测HaloTag® 融合蛋白，也可监测HaloLink™ 树脂对蛋白的固定化效率，这是通过使用HaloTag® TMR 荧光配基进行标记，然后再进行SDS-PAGE 而实现的。实验指南可在下述技术手册中找到：HaloLink™ Resin 技术手册 #TM250, HaloLink™ Protein Array 技术手册 #TM310, 和HaloCHIP™ System 技术手册 #TM075。实验过程概述HaloTag® 蛋白是一个34kDa 的突变水解酶，通过一个被固化的氯化烷配基与HaloLink™ 树脂发生共价结合。TEV 蛋白酶可从HaloLink™ 树脂上将目的蛋白切下。TEV 蛋白酶具有一个N 端HQ标签，可以使用HisLink™ 树脂与目的蛋白分离开，这样就得到了纯化的目的蛋白。编码HaloTag® 蛋白并能够在大肠杆菌中使目的蛋白达到最优表达的最适载体是pFN18A HaloTag® T7 Flexi® Vector(G2751) 和pFN18K HaloTag® T7 Flexi® Vector (G2681)。这些载体可以单独购买。 特点 •  与His-Tag, GST 和MBP 亲和标签相比较，本系统产量大、纯度高、能够获得具有功能的可溶性蛋白：HaloLink™ 树脂以共价结合的方式捕获和固定HaloTag® 融合蛋白，特异性高。• 在原核、哺乳动物细胞和无细胞表达系统中，目的蛋白的表达得到增强：蛋白以HaloTag® 融合蛋白的形式表达。• 纯化表达量少的融合蛋白：HaloLink™ 树脂能快速、特异性地以共价结合的方式捕获HaloTag® 蛋白，这是一个非平衡过程。• 使用TEV 蛋白酶剪切，可高效回收目的蛋白：TEV 蛋白酶剪切HaloTag® 蛋白和目的蛋白之间的连接肽段，其识别位点已经经过优化。由于是共价连接，HaloTag® 蛋白仍固定在树脂上。• 节省时间：仅使用一种与下游应用兼容的缓冲液，即可支持所有的纯化步骤。• 使用HaloTag® 荧光配基可轻松实现凝胶内检测和蛋白表达水平的定量：HaloTag® 蛋白- 配基相互作用非常稳定，可以在含有SDS 的样品缓冲液中煮沸，并直接使用SDS-PAGE 分离。 操作手册 Technical Manual TM312 储存条件 将HaloLink™ 树脂和HisLink™ 树脂储存于4℃。不要将树脂冷冻。将TEV 蛋白酶储存于–20℃。