【评价原理】人和斑马鱼的细胞在高渗溶液中会造成失水皱缩，用高于斑马鱼体内渗透压的氯化钠处理斑马鱼，导致斑马鱼尾部因脱水而面积皱缩、变小。【实验方案】我们将发育正常且阶段一致的斑马鱼随机分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和补水保湿剂。其中正常对照组未加入氯化钠，模型对照组与补水保湿剂组加入了等量的氯化钠（氯化钠通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。补水保湿剂组在加入氯化钠的同时加入玻尿酸之类的补水保湿剂。加入一段时间补水保湿剂后，观察斑马鱼尾部面积的变化。【结果展示】图1. 斑马鱼尾部面积表型图可以看到，补水保湿剂组的斑马鱼尾部面积与未摄入氯化钠的正常对照组比较相似，尾部没有明显皱缩。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用补水保湿剂组的尾部面积与未摄入氯化钠的正常对照组相似，并未出现模型对照组尾部脱水皱缩的情况。2.本实验证实了玻尿酸具有补水保湿功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

暴露于生活环境中的皮肤，接触到有毒有害物质后可能引起一定程度的皮肤炎症，出现皮肤红肿、瘙痒等现象。一些医美类化妆品除具有常规护肤功效外还能起到抗炎舒缓作用。通过斑马鱼技术能有效评价化妆品及其原料抗炎舒缓功效。【评价原理】化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症，炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。十二烷基磺酸钠（SLS）是人体皮肤刺激物模型斑贴试验常见的阳性对照物，SLS刺激后能诱发表皮炎症细胞浸润，刺激物进入斑马鱼体内，诱导炎症反应，中性粒细胞发生免疫应答，向皮肤表皮迁移并聚集。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组（供试品通过溶解到标准稀释水中的方式接触到斑马鱼皮肤）。正常对照组不做处理，模型对照组仅用SLS处理，供试品组在用SLS的同时添加受试化妆品。孵育一段时间后，我们将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照，以皮肤表面中性粒细胞数量评价供试品的抗炎舒缓功效。【结果展示】图1 斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图黄色虚线区域为计算区域，绿色荧光点为中性粒细胞可以看到，供试品组斑马鱼的中性粒细胞数目比模型对照组少，与正常对照组相似。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验，水溶给予供试品组的斑马鱼中性粒细胞数目比模型对照组少，与正常对照组相似。。2.本实验证实了该供试品具有抗炎舒缓功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

急性毒性试验是了解外源化学物对机体产生急性毒性的根本依据，也是毒理学安全性评价的一步工作，斑马鱼早期发育阶段的胚胎期是其对外界环境敏感的阶段。斑马鱼的急性胚胎毒性对于化妆品的安全性评价具有重要的实际意义。【评价原理】将斑马鱼胚胎暴露于不同浓度的受试物溶液，一定时间段后记录斑马鱼胚胎的死亡率，确定50%试验鱼胚胎死亡的受试物浓度，用LC50表示。【实验方案】配制一定浓度系列的受试物溶液，在斑马鱼发育初期（4hpf-6hpf）分别水溶加入受试物，同时设置正常对照组，孵育48h后分别观察每组斑马鱼的发育状况，以卵凝结、体节异常、尾部未分离等判定胚胎死亡。记录每组斑马鱼胚胎的死亡率，绘制“浓度-死亡率”效应曲线，计算LC50值。【结果展示】1、斑马鱼胚胎死亡判定图1.斑马鱼胚胎死亡表型图2、LC50值：“浓度-死亡率”效应曲线图2. 斑马鱼胚胎“浓度-死亡率”效应曲线【评价结论】经过48小时的实验，斑马鱼胚胎随着受试物浓度的增加逐渐出现死亡特征，LC50值为31.5μg/ml。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

化妆品中刺激性物质作用于机体后可能引发机体产生刺激、过敏等一系列的反应，其中主要的是刺激反应，可导致水肿、红斑、瘙痒、疼痛等症状。化妆品对皮肤的刺激表型主要表现为皮肤炎症，炎症早期主要表现为毛细血管扩张、通透性亢进和水肿。【评价原理】刺激物进入斑马鱼体内，诱导炎症反应，中性粒细胞发生免疫应答，向皮肤表皮迁移并聚集。通过在荧光显微镜下对斑马鱼皮肤表面的中性粒细胞进行计数，从而反映受试物刺激性强度。【实验方案】将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照和化妆品组（供试品通过溶解到标准稀释水中的方式摄入到斑马鱼体内）。使用化妆品一段时间后，将斑马鱼整体放到荧光显微镜下拍照，以皮肤表面中性粒细胞数量评价化妆品的刺激性。【结果展示】图1. 斑马鱼皮肤中性粒细胞表型图黄色虚线区域为计算区域可以看到，化妆品组斑马鱼皮肤表面中性粒细胞数量显著上升。【评价结论】1、经过各组斑马鱼的对比实验，化妆品组的斑马鱼皮肤表面中性粒细胞数量明显增多，与正常对照组存在明显的差别。2、本实验证实了该化妆品对斑马鱼有刺激性。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

雌激素是一类固醇激素，目前已成为一种新兴的污染物。一些无良商家为片面追求功效而在护肤产品中违规添加，导致很多女性因使用了此类护肤品而出现“激素脸”，表现为面部翻红、发痒、干燥脱皮，甚至烂脸流脓。环特生物应用诺贝尔奖技术——荧光蛋白基因转移技术，可实现对化妆品中雌激素类化学物质的直观、精确和高效的检测评价。【评价原理】通过转基因标记表达的绿色荧光蛋白含量来反映雌激素含量，绿色荧光蛋白特异性地在肝脏进行表达，一旦供试品中含有雌激素类化学物质，转基因斑马鱼暴露后肝脏部位会出现特异性绿色荧光，可用绿色荧光量化供试品中的雌激素含量，从而达到评价效果。【实验方案】我们将受试的斑马鱼分为两组，分别为正常对照组和供试品组。在相同的温、湿度条件下培育一段时间后，在显微镜下对肝脏部位的绿色荧光进行量化分析。【结果展示】 图1. 雌激素处理后斑马鱼荧光表型图可以看到，用供试品处理后的斑马鱼在肝脏部位显示明显的绿色荧光。【评价结论】1、经过各组斑马鱼的对比实验，雌激素处理组斑马鱼的肝脏部位出现明显的绿色荧光，与正常对照组存在明显的差别；2、本实验说明供试品中存在雌激素类有害物质。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

过敏反应通常会引起许多皮肤症状，比如皮肤发红、发痒，严重的患者还会出现刺痛或者面部出现红斑、风团、丘疹或丘疱疹等症状。敏感性肌肤的人群选用化妆品时，需要特别关注化妆品的致敏性。通过斑马鱼技术可以有效评价化妆品及其原料的致敏性。【评价原理】过敏反应的主要原因是过敏原/致敏因子诱导组织学上肥大细胞脱颗粒，释放多种活性介质进而诱发各种过敏症状。其中类胰蛋白酶是肥大细胞内预先合成的中性蛋白酶，是临床上检验人体是否过敏的重要指标。斑马鱼产生过敏反应时，同样会诱导肥大细胞分泌类胰蛋白酶。因此，通过检测斑马鱼整体类胰蛋白酶水平可以判断化妆品及其原料的致敏性。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成若干组组，包含正常对照组和化妆品组。其中正常对照组未加入化妆品，化妆品组分别加入不同剂量（化妆品通过溶解到标准稀释水中的方式添加到实验体系中）的样品。处理24 h后，利用酶标仪检测各组吸光度值（OD值），以类胰蛋白酶的表达水平评价化妆品致敏作用。此外，可以通过斑马鱼病理切片，用PAS染色后观察肠道壁上肥大细胞的状况反映化妆品的致敏性。【结果展示】（展示图片仅供参考，实际实验组别依据合同而定）图1. 斑马鱼类胰蛋白酶含量（吸光度值）与正常对照组比较，*p < 0.05，***p < 0.001可以看到，化妆品中剂量和高剂量组类胰蛋白酶含量与正常对照组比较明显升高，具有致敏性，低剂量组无致敏性。图2. 斑马鱼体内肥大细胞染色典型图（箭头指示为肥大细胞）从经过PAS染色的病理切片中也能看出来，化妆品组斑马鱼的肠道壁上的肥大细胞与正常对照组相比数量明显增加。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验，化妆品中、高剂量组斑马鱼类胰蛋白酶含量和肠道壁上的肥大细胞数量与正常对照组相比数量明显增加。2.本实验证实了该化妆品具有明显的致敏作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

紫外线是导致皮肤损伤或病变的重要因素，未进行防晒的皮肤暴露在紫外线下可能出现皮炎、红斑、黑色素增多等现象，类似的，斑马鱼的尾鳍受紫外线照射后将出现尾鳍褶皱，面积缩小等现象，使用化妆品后，通过定量评价斑马鱼尾鳍面积的复苏情况评价其抗光老化功效。【评价原理】通过紫外光照射使斑马鱼尾鳍形成损伤，添加化妆品后，采用拍照方式对斑马鱼尾鳍进行图像采集，分析斑马鱼尾鳍损伤程度并判定抗光老化功效。【实验方案】我们将斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组、化妆品组。正常对照组不做处理，模型对照组和化妆品组分别进行紫外光多次照射，随后化妆品组中定量加入受试化妆品，孵育一段时间后，三组斑马鱼分别进行尾鳍拍照处理，分析斑马鱼尾鳍面积，从而评价抗光老化功效。【结果展示】图1. 斑马鱼尾鳍损伤面积表型图（红色为分析区域）【评价结论】1.经过各组斑马鱼对比实验，与模型对照组尾鳍面积相比，化妆品组具有明显改善作用。2.本实验证实了该化妆品具有抗光老化的作用。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

空调、环境污染、季节转换带来的温度变化与压力，以及皮肤衰老、代谢减缓等因素，都会造成肌肤水份流失，令肌肤粗糙、黯哑、形成干纹、引发诸多肌肤问题。皮肤缺水可表现为表面失去光泽变得暗淡无光，失去弹性，出现细纹。补水保湿是护肤化妆品最基础的功效，通过斑马鱼技术能有效评价化妆品及其原料的补水保湿功效。【评价原理】斑马鱼用氯化钠处理，由于渗透压的原因皮肤表面将会失水皱缩，尾部面积因皱缩而变小，通过对尾部面积的影响评价化妆品的补水保湿效果。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和供试品组（供试品通过溶解到标准稀释水中的方式接触到斑马鱼皮肤）。正常对照组不做处理，模型对照组用氯化钠溶液处理，供试品组在用氯化钠处理的同时定量加入受试的化妆品。孵育一段时间后，对斑马鱼进行拍照，以斑马鱼尾部面积评价供试品的补水保湿功效。【结果展示】图1 斑马鱼尾部面积（红色区域为尾部面积）模型对照组斑马鱼尾鳍皱缩、面积明显减小可以看到，供试品组斑马鱼的尾部面积与正常对照组相似，没有明显的皱缩。【评价结论】1.经过各组斑马鱼的对比实验，供试品组的斑马鱼尾部面积与正常对照组相似，没有出现明显的皱缩。2.本实验证实了该供试品对具有明显的补水保湿功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

皮肤微循环是指微动脉和微静脉之间的血液循环。血液循环最根本的功能是进行血液和组织之间的物质交换，皮肤微循环状态与皮肤衰老密切相关。【评价原理】转基因血管内皮绿色荧光斑马鱼的节间血管可以在荧光显微镜下被明显地观察到，因而可以通过观察受试物对节间血管直径的影响来评价受试物促进血管新生的功效，进而表征改善微循环功效。此外，可以利用血流分析仪检测受试斑马鱼的血流速度，补充评价改善微循环功效。【实验方案】将斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和供试品组。正常对照组不做处理，供试品组添加一定浓度的受试化妆品，孵育24h小时后，在荧光显微镜下观察斑马鱼节间血管并拍照保存图片，用高级图像处理软件进行图像分析，计算斑马鱼节间直径，通过其统计学意义评价供试品改善微循环功效。此外，通过血流分析仪分析观察各组斑马鱼的血流速度，以血流速度的增加量评价受试化妆品改善微循环功效。【结果展示】1、斑马鱼节间血管直径图4. 供试品改善微循环功效表型图黄色虚线标记部分为斑马鱼肠下血管，红色箭头所指为出芽数2、斑马鱼血流速度（提供各组实验柱状图）图5 斑马鱼血流速度与模型对照组比较，***p<0.001【评价结论】1、经过斑马鱼对比实验，供试品组与正常对照组对比，肠下血管面积增大，出芽数增多，直径变大。2、与正常对照组相比，化妆品组斑马鱼血流速度明显增大。3、本实验证实了该化妆品具有改善微循环的功效。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

化妆品中的功效活性成分是通过经皮吸收到达皮肤各层而发挥作用的，许多在体外试验中表现良好的活性物质在消费者实际使用过程中并未达到理想的功效结果，这与活性物的经皮吸收性能密切相关。斑马鱼的皮肤结构与人体高度相似，因此活性成分在活体斑马鱼上的经皮吸收结果可以反映在人体皮肤上的吸收状况。【评价原理】    通过高效液相色谱法定量检测养鱼用水在孵育斑马鱼一段时间后的活性成分含量变化反映活性成分经斑马鱼的皮肤吸收状况，含量的减少量即为斑马鱼的经皮吸收量。【实验方案】我们将受试的斑马鱼分为三组，分别为正常对照组（不含活性物）、活性物对照组（不含鱼）和受试物组。在相同的温、湿度条件下孵育一段时间，在孵育前后分别检测各组中活性成分的含量。【结果展示】图1. 活性成分在不同组别中的色谱图可以看到，受试物组的斑马鱼养鱼用水中的活性成分，在孵育后发生减少，减少量即为经皮吸收量。【评价结论】1、正常对照组的鱼水中未检测到活性成分，说明该方法不存在基体干扰；2、活性物对照组孵育前后活性物含量无明显变化，说明在没有斑马鱼存在的孵育条件下活性物含量不发生变化；3、受试物组，孵育后活性物含量明显低于孵育前，说明活性成分被经皮吸收至斑马鱼体内，经皮吸收量即为鱼水中的减少量。更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）