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杭州环特生物科技股份有限公司

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【评价原理】过高的血尿酸浓度可以引起痛风,并与其他代谢类疾病相关联。斑马鱼具有与嘌呤代谢有关的黄嘌呤脱氢酶,尿酸氧化酶,尿囊素酶和尿囊酸酶。尿酸氧化酶是动物嘌呤代谢过程中一种重要的酶,能催化尿酸氧化生成尿裹素、CO2和H2O2。大多数脊椎动物的肝脏、肾脏和脑髓里均发现有此酶的存在。经过尿酸荧光试剂盒特异性反应,患有高尿酸的斑马鱼的尿酸荧光信号强度会比正常斑马鱼的尿酸荧光信号强度明显增多。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组、模型对照组和降尿酸产品组。其中正常对照组未摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤,模型对照组与降尿酸产品组都摄入了等量的氧嗪酸钾和黄嘌呤(氧嗪酸钾和黄嘌呤通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。降尿酸产品组在摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤的同时摄入鲣鱼胶原肽和蛹虫草之类的降尿酸产品。服用一段时间降尿酸产品组后,我们用尿酸荧光检测试剂盒检测斑马鱼体内尿酸水平。【结果展示】图1. 斑马鱼体内尿酸水平(荧光信号强度)与模型对照组比较,*** p < 0.001可以看到,服用降尿酸产品组的斑马鱼体内尿酸水平与未摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤的正常对照组相似,没有明显的尿酸升高现象。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

【评价原理】斑马鱼作为一种理想的人类血液毒性模型,是以其造血系统与人类造血系统在进化上高度保守性尾前提的。通过与人类造血类似的信号传导通路,斑马鱼形成了以包括红系、髓系、淋系及巨核系为主的造血系统。斑马鱼可建立多种血液系统毒性模型,主要包括红细胞、白细胞、出凝血障碍性毒性三大类,因此主要与斑马鱼中性粒细胞、巨噬细胞、红细胞和血流量相关。由于斑马鱼具有身体积小、实验周期短等优点,可以用作评估血液毒性的一种便捷模型。转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼中性粒细胞自身发出荧光,可以直接在荧光显微镜下观察中性粒细胞个数;黑色素等位基因突变斑马鱼通体透明,经过巨噬细胞染色后可以直接在显微镜下观察巨噬细胞数量;利用邻联茴香胺将斑马鱼心脏红细胞染色,在显微镜下可以直接观察红细胞数量(信号强度)。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。处理结束后,(1)通过荧光显微镜观察并统计斑马鱼中性粒细胞数量;(2)通过染色斑马鱼巨噬观察巨噬细胞细胞数量;(3)通过邻联茴香胺染色心脏部位红细胞,在显微镜下观察心脏红细胞染色强度。【结果展示】图1.斑马鱼中性粒细胞表型图(绿色小点为中性粒细胞)可以看到,供试品组中性粒细胞个数较正常对照组明显减少。图2.斑马鱼巨噬细胞表型图(红色小点为巨噬细胞)可以看到,供试品组巨噬细胞数量较正常对照组明显减少。图3.斑马鱼红细胞抑制表型图(蓝色虚线框内为分析区域,分析红细胞染色强度)可以看到,供试品组心脏红细胞染色强度较正常对照组明显降低。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,供试品组的中性粒细胞数量、巨噬细胞数量明显减少,红细胞染色强度明显降低。2.本实验证实了此供试品诱发血液毒性。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

【评价原理】蛋黄粉中含有大量的脂肪、胆固醇和卵磷脂等。由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统,如肝脏、肠道等,消化和营养的吸收及运输与人类高度相似。用蛋黄粉喂饲斑马鱼,相当于摄入了大量脂肪。经过脂肪特异性荧光染色(呈红色),摄入大量蛋黄粉的斑马鱼的肠道和血管会明显比正常斑马鱼的肠道和血管要红很多,由于斑马鱼通体透明的特点,可以明显被观察到。【实验方案】受测试斑马鱼均摄入蛋黄粉(蛋黄粉通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内),饲喂数天后,我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是模型对照组和服用抑脂产品组服用抑脂产品组摄入奥利司他之类的抑脂产品。服用一段时间抑脂产品后,我们对斑马鱼做脂肪特异性染色,观察肠道和血管中的脂肪变化。【结果展示】图1. 斑马鱼肠腔和血管中的脂肪染色表型图虚线及箭头表示染色后的脂肪区域,区域内红色代表脂肪可以看到,服用抑脂产品组肠腔和血管中脂肪较少,未出现模型对照组明显脂肪沉积的情况。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抑脂产品组肠腔和血管中脂肪较少,未出现模型对照组肠腔和血管中明显脂肪沉积的情况。2.本实验证实了奥利司他具有明显抑脂功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

环特生物,利用斑马鱼模型实验,为功能食品/保健食品企业提供产品功效评价、功能检测、毒理安全性评价、原料筛选验证及安全检测、微生物检测等服务,周期短、费用低、直观高效。助力企业做好研发、品控和推广。食品/保健食品及原料 评价检测项目功效评价检测安全性评价-毒理评价检测更多的食品/保健食品评价检测项目及内容,请拨电话咨询:0571-83782130环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证,自有2000m²斑马鱼生物评价实验室。环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域,已牵头起草发布团体标准10项,申请发明专利64余项,自主开发的主要斑马鱼模型150多种,发表SCI及核心期刊论文120余篇,公司已累计完成项目超5000个,建立长期合作客户600多家。

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【评价原理】通常来说,炎症是机体的一种抗病反应,机体蒙受损坏后,机体的内坏境以及内境界和外坏境之间达到新的均衡的过程中会引发组装细胞的损坏,使片面组装细胞显现变性、坏死。利用转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼(MPO)作为模型,当体内炎症水平上升的时候,中性粒细胞的数量也就相对的增高,在荧光显微镜下,中性粒细胞的数量也就是表现出炎症反应程度的一个重要指标。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照与供试品组,通过服用/注射供试品一段时间后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼中性粒细胞的数量,同时检测体内炎症因子IL-6的表达情况。【结果展示】图1. 斑马鱼中性粒细胞数量(白色箭头为斑马鱼侧线中性粒细胞)从实验结果可以看到,供试品组相对正常对照组斑马鱼侧线位置中性粒细胞数显著增多。图2:斑马鱼体内的中性粒细胞数量及体内炎症因子表达水平的变化从实验结果可以看到,斑马鱼供试品组相对正常对照组,IL-6炎症因子相对表达量下降。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,相对于正常对照组,服用或者注射供试品组之后,中性粒细胞增多和炎症因子上升。2.本实验证实了供试品组等具有增加中性粒细胞数量,以及促进炎性因子表达的功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

【评价原理】由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统,如肝脏、肠道等,消化和营养的吸收及运输与人类高度相似。斑马鱼的卵黄囊70%左右是中性脂肪,如果能够促进斑马鱼卵黄囊的吸收,就相当于可以促进脂肪的分解和代谢,类似于体内脂肪燃烧。经过脂肪特异性荧光染色(呈红色),斑马鱼的卵黄囊被染红,可以明显被观察到。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成三组,分别是正常对照组和服用燃脂产品组。其中正常对照组未摄入其他物质,服用燃脂产品组摄入了白藜芦醇之类的燃脂产品(燃脂产品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。服用一段时间燃脂产品后,我们对斑马鱼卵黄囊做脂肪特异性荧光染色,观察卵黄囊的脂肪颜色变化。【结果展示】图1. 斑马鱼卵黄囊脂肪表型图黄色虚线区域为斑马鱼卵黄囊可以看到,服用燃脂产品的斑马鱼卵黄囊荧光强度与正常对照组明显减弱。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用燃脂产品组卵黄囊荧光强度与正常对照组比较明显减弱。2.本实验证实了白藜芦醇具有明显燃脂(促进脂肪代谢)功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

【评价原理】斑马鱼与人类的基因相似率高达87%, 与哺乳类动物相比, 斑马鱼的信号传导以及生理结构和功能方面都非常相似。斑马鱼能够对保健品在体内的分布情况、吸收情况、代谢以及排泄等生理动态方面提供准确的信息, 尤其对小分子所引起的内分泌紊乱、再生毒性、行为缺陷、致畸、心血管毒性、肝毒性等毒性反应与人具有高度相似性。因此,使用斑马鱼作为保健品早期的安全性评价是非常可靠的。用石蜡包埋法制作斑马鱼病理切片,在显微镜下可观察各靶器官毒性情况。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和服用供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中摄入到斑马鱼体内)。通过环特生物剂量换算公式,将人每日推荐服用剂量换算为斑马鱼使用浓度进行安全性评价。服用一段时间供试品后,将斑马鱼固定、脱水、包埋、切片,进行H&E染色,我们观察斑马鱼各组织脏器结构病理变化。【结果展示】图1. 斑马鱼肝脏病理切片可以看到,正常对照组肝组织结构规则,肝细胞形态完整,细胞质均匀,细胞核呈规则圆形,位于细胞中央;供试品组肝脏红细胞淤积严重,细胞肿胀现象严重,局部可见炎性浸润,坏死。【评价结论】1.经过每组10尾斑马鱼的对比实验,服用供试品组的斑马鱼诱发明显的肝脏毒性,。2.本实验证实了该供试品对斑马鱼有长期毒性风险。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

【评价原理】近年来,随着工业化的发展,空气污染越来越严重,雾霾天也越来越多,对人的侵害也越来越严重。二氧化硫、氮氧化物、可吸入颗粒物(PM10)和细颗粒物(PM2.5)是雾霾的主要组成成分。研究表明,进入斑马鱼和大鼠体内的纳米活性炭颗粒能通过肠道的杯状细胞分泌而排泄,这一新颖的纳米排泄途径被命名为肠杯状细胞分泌通路(IGCSP)。用红色荧光微球模拟PM2.5微粒,激活斑马鱼炎症机制,引起其体内吞噬细胞的吞噬作用肠道分泌得以将异物排除。根据体内荧光微球的数量(呈红色),抗雾霾剂组斑马鱼体内微球数量明显减少。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是模型对照组和抗雾霾剂组。其中模型对照组与服用抗雾霾剂组都给予了等量的荧光微球(荧光微球通过注射方式到斑马鱼体内)。抗雾霾剂组在注射荧光微球的同时摄入冬虫夏草之类的抗雾霾剂。服用一段时间抗雾霾剂后,我们在荧光显微镜下观察斑马鱼体内荧光微球数量的变化来反映机体清除PM2.5的能力。【结果展示】图1. 斑马鱼抗雾霾表型图红色点为荧光微球可以看到,服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。【评价结论】1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验,服用抗雾霾剂组的荧光微球数量与模型对照组比较明显减少。2.本实验证实了冬虫夏草具有抗雾霾功效。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)

【评价原理】斑马鱼胚胎在母体外发育,从合子期到孵化期仅72小时,且发育的完整过程均是透明的,利于实时观察和检测。斑马鱼幼鱼长3~4毫米,拥有6-384孔板的高通量检测体系,可实现低费-高效筛选。斑马鱼与人类基因同源性达到87%,用于保健食品的体内快速评价实验结果可比性强。故可以利用斑马鱼早期各个阶段的发育形态,准确高效的确定保健食品暴露在胚胎中的毒性,广泛应用于保健食品的发育毒性与致畸性研究。实验结束后,在显微镜下观察并记录各浓度组织器官反应及死亡情况,用来保健食品对斑马鱼的毒性,并对典型毒性器官进行拍照。【实验方案】我们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照组和保健食品组。其中正常对照组为标准稀释水处理组,保健食品组按照既定浓度摄入了不同浓度的待测保健食品(待测保健食品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。在保健食品暴露过程中,每天观察记录各个浓度组斑马鱼的死亡情况,并及时挑除死鱼。实验结束后,统计斑马鱼死亡情况并使用OriginPro 8软件拟合数据曲线,获得保健食品的最大非致死浓度(MNLC)和LC10。保健食品暴露一段时间后,我们在显微镜下观察记录斑马鱼身体各个指标的情况并对典型毒性器官进行拍照。【结果展示】图1. 斑马鱼发最大非致死浓度(MNLC)和LC10摸索数据拟合图可以看到,该保健食品的MNLC为313 μg/mL,LC10为350 μg/mL。图2. 斑马鱼发育毒性与致畸性表型图H=Heart;J=Jaw;In=Intestinal tract;L=Liver;Y=Yolk sac;E=Eye可以看到,保健食品组较正常对照组出现卵黄囊吸收延迟、心包水肿、体长变短、眼变小和肝变形。【评价结论】1.该保健食品的MNLC为313 μg/mL,LC10为350 μg/mL,诱发斑马鱼卵黄囊吸收延迟、心包水肿、体长变短、眼变小和肝变形。2.本实验证实了该保健食品对斑马鱼有发育毒性与致畸性风险。更多项目服务,请拨电话咨询:0571-83782130,项目经理手机 17364531293(微信同号)