类器官简介

类器官是一种原代组织来源的成体干细胞体外自组装成的3D器官型结构，可分化为多个器官特异性的细胞类型，并能够表现出细胞与细胞之间、细胞与其周围基质之间的相互作用和空间位置形态，在体外重现人体真实器官的一些关键功能和结构，并具有稳定的表型和遗传学特征。

作为新兴的生物学模型，类器官具有细胞系和动物模型所不具有的独特优势，其细胞组成和结构更加类似人体组织，可提供一个高度生理相关的系统，是基础研究的模型。同时，类器官模型相对实验动物更加经济，且时效性更高，可以提高研究效率。

类器官模型的应用

类器官模型的优势

·速度快 ·通量高 ·临床相关性强

类器官的构建

建立PSC和AdSc类器官的过程

● 以 iPS/ES 或成体干细胞为起点, 在 3D 环境下, 利用细胞因子将干细胞定向分化后建立的, 具有各种器官主要组织细胞类型及组织特征的微型结构。

● 多能干细胞(PSC)来源的类器官是在PSCs定向分化后建立的, 首先是胚层的形成, 随后是诱导和成熟, 通过加入特定的生长和信号因子来获得所需的器官特定细胞类型。

● 成体干细胞(AdSC)衍生的类器官培养需要分离组织特异性干细胞群, 然后将其嵌入细胞外基质中, 并加入明确的组织特异性生长因子, 实现类器官的增殖。

类器官构建委托技术服务

环特生物简介

医-健-美-食产业斑马鱼技术应用服务商

环特生物，已通过CNAS、CMA、ILAC-MRA、AAALAC资质认证。

环特生物，是专注服务于生物医药和大健康美妆产业的一站式功效与安全评价技术提供商。经多年发展，已形成了以斑马鱼平台为核心，以类器官、哺乳动物、人体和微生物平台为特色，兼具生物医药CRO能力和大健康美妆一站式研发检测的产业平台新格局。

作为斑马鱼技术应用服务商，环特生物深度挖掘、创新斑马鱼技术的应用场景，将斑马鱼模型、基因编辑技术和模型，成功应用于药物、保健食品、化妆品、功能食品的原料筛选、配方研发、生产质控、营销背书、新品备案以及斑马鱼实验室的建设运营，为企业提供全产业链条上的功效和安全评价的技术服务。

类器官构建委托技术服务，请拨电话咨询 0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）。

【评价原理】

过高的血尿酸浓度可以引起痛风,并与其他代谢类疾病相关联。斑马鱼具有与嘌呤代谢有关的黄嘌呤脱氢酶，尿酸氧化酶，尿囊素酶和尿囊酸酶。尿酸氧化酶是动物嘌呤代谢过程中一种重要的酶,能催化尿酸氧化生成尿裹素、CO2和H2O2。大多数脊椎动物的肝脏、肾脏和脑髓里均发现有此酶的存在。

经过尿酸荧光试剂盒特异性反应，患有高尿酸的斑马鱼的尿酸荧光信号强度会比正常斑马鱼的尿酸荧光信号强度明显增多。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和降尿酸产品组。其中正常对照组未摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤，模型对照组与降尿酸产品组都摄入了等量的氧嗪酸钾和黄嘌呤（氧嗪酸钾和黄嘌呤通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。降尿酸产品组在摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤的同时摄入鲣鱼胶原肽和蛹虫草之类的降尿酸产品。

服用一段时间降尿酸产品组后，我们用尿酸荧光检测试剂盒检测斑马鱼体内尿酸水平。

【结果展示】

图1. 斑马鱼体内尿酸水平（荧光信号强度）

与模型对照组比较，*** p < 0.001

可以看到，服用降尿酸产品组的斑马鱼体内尿酸水平与未摄入氧嗪酸钾和黄嘌呤的正常对照组相似，没有明显的尿酸升高现象。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

环特生物可定制的斑马鱼实验模型有数百种，主要应用于化妆品,保健食品,药物功效与安全性评价、药理毒理评价、临床前研究实验、药物高通量筛选、化合物筛选、活性成分筛选、分子生物学实验、斑马鱼行为分析等，周期短、费用低、高效专业。

▼斑马鱼模型实验-CRO实验外包-定制服务项目（部分）

▼药物实验类服务项目（CRO外包委托实验）

▼食品/保健食品功效与毒性安全性评价检测项目（部分）

▼化妆品/原料 评价备案检测项目（部分）

更多更详细的斑马鱼模型实验定制服务项目，请拨电话咨询 0571-83782130，项目经理手机 17364531293。

环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证，自有2000m²斑马鱼生物评价实验室。

环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准10项，申请发明专利64余项，自主开发的主要斑马鱼模型150多种，发表SCI及核心期刊论文120余篇，已有7个新药项目成功将环特生物斑马鱼实验数据用于CFDA的临床试验申报，公司已累计完成项目超5000个，建立长期合作客户600多家。

环特生物，利用斑马鱼模型实验，为客户提供毒性评价、毒理学实验、急毒长毒实验、化妆品,保健食品,药物毒性评价检测、生态水质毒性检测等服务，周期短、费用低、高效专业。

毒性实验-毒理学评价检测

疾病/病理 毒性评价-安全性评价模型

更多的毒理实验-毒性评价检测及内容，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293

环特生物公司已通过国家CNAS、CMA资质认定和AAALAC国际认证，自有2000m²斑马鱼生物评价实验室。

环特生物在斑马鱼技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准10项，申请发明专利64余项，自主开发的主要斑马鱼模型150多种，发表SCI及核心期刊论文120余篇，已有7个新药项目成功将环特生物斑马鱼实验数据用于CFDA的临床试验申报，公司已累计完成项目超5000个，建立长期合作客户600多家。

【评价原理】

斑马鱼作为一种理想的人类血液毒性模型，是以其造血系统与人类造血系统在进化上高度保守性尾前提的。通过与人类造血类似的信号传导通路，斑马鱼形成了以包括红系、髓系、淋系及巨核系为主的造血系统。斑马鱼可建立多种血液系统毒性模型，主要包括红细胞、白细胞、出凝血障碍性毒性三大类，因此主要与斑马鱼中性粒细胞、巨噬细胞、红细胞和血流量相关。由于斑马鱼具有身体积小、实验周期短等优点，可以用作评估血液毒性的一种便捷模型。

转基因中性粒细胞绿色荧光斑马鱼中性粒细胞自身发出荧光，可以直接在荧光显微镜下观察中性粒细胞个数；黑色素等位基因突变斑马鱼通体透明，经过巨噬细胞染色后可以直接在显微镜下观察巨噬细胞数量；利用邻联茴香胺将斑马鱼心脏红细胞染色，在显微镜下可以直接观察红细胞数量（信号强度）。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和供试品组(供试品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内)。

处理结束后，(1)通过荧光显微镜观察并统计斑马鱼中性粒细胞数量；(2)通过染色斑马鱼巨噬观察巨噬细胞细胞数量；(3)通过邻联茴香胺染色心脏部位红细胞，在显微镜下观察心脏红细胞染色强度。

【结果展示】

图1.斑马鱼中性粒细胞表型图

（绿色小点为中性粒细胞）

可以看到，供试品组中性粒细胞个数较正常对照组明显减少。

图2.斑马鱼巨噬细胞表型图

（红色小点为巨噬细胞）

可以看到，供试品组巨噬细胞数量较正常对照组明显减少。

图3.斑马鱼红细胞抑制表型图

（蓝色虚线框内为分析区域,分析红细胞染色强度）

可以看到，供试品组心脏红细胞染色强度较正常对照组明显降低。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，供试品组的中性粒细胞数量、巨噬细胞数量明显减少，红细胞染色强度明显降低。

2.本实验证实了此供试品诱发血液毒性。

更多项目服务，请拨电话咨询：0571-83782130，项目经理手机 17364531293（微信同号）

● 项目意义

肿瘤类器官是将肿瘤患者的新鲜组织经体外3D培养系统建立的、与肿瘤患者特征高度相似的一种立体模型，已被证实与患者肿瘤的病理组织学特征、分子特征、药物敏感性等保持高度一致，在对应的药物筛选领域有着巨大的应用空间。

同时，环特生物已建立的多癌种实体瘤斑马鱼PDX药敏评价体系已用于临床，为患者提供精准的用药指导。我们基于真实世界肿瘤患者的临床研究，联合国内知名三甲医院，开展全世界首个胃癌斑马鱼PDX与患者治疗效果的一致性评价项目（美国临床研究Clinical Trials注册号：NCT05616533），为斑马鱼PDX的临床应用提供更加充分的科学依据。

为满足不同科研场景的行业需求，环特生物联合该医院共同发起“基于胃癌的斑马鱼PDX与类器官抗肿瘤药效评价的科研项目”，通过构建胃癌的精准医疗生物样本库，致力于为广大药企的抗肿瘤药物提供药效评价的科研服务。

● 预期成果

1）构建不少于50例基于胃癌的类器官生物样本库，并完成类器官样本的临床信息、基因信息的采集

2）按需交付药物在胃癌斑马鱼PDX或类器官模型中的定性、定量数据

3）共同产出数篇国际前沿的科研论文

4）实现相关课题项目、技术创新奖项的申报

● 合作伙伴权益

标准权益——

1）享有项目所述样本库的“联合建设单位”两年冠名权

2）享有该项目最终成果的宣传权利

3）项目结束后，一定期限内享受特定数量的药物药效评价折扣

定制（付费）权益——

1）类器官药物研发平台建设（含培训1-3名类器官技术人员、胃癌类器官构建方法的技术转让）

2）其他相关需求及服务

● 项目分工

1）合作医院负责提供胃癌肿瘤组织样本

2）环特生物负责斑马鱼PDX与类器官样本库的构建服务与药效评价

3）药合作伙伴负责根据实际科研需求提供药物和科研经费

● 申报条件

1）具有一定新药研发经验的大中型药物研发机构

2）药物类型为胃癌的化疗药物、靶向药物（免疫类药物除外）、中药，以及辅助治疗的相关药物

● 合作伙伴名额

预计招募合作单位3家

● 项目周期

5-6个月

● 合作详询：成先生 17364531293

 环特小鼠PDX技术服务 

环特小鼠PDX模型平台，作为优秀的肿瘤动物模型平台，其构建过程包括从患者体内获取原代肿瘤样本，将样本移植到实验动物体内培养，并进行连续传代。目前环特已成功构建了10多种小鼠PDX模型，对组织微环境中的分子及其相关因子进行全面分析，为客户提供仿临床药效评价、筛选新抑制剂/抗体/ADC耐药性模型、基于临床样本测试新药有效性及肿瘤免疫研究等深度科研服务解决方案，助力肿瘤研究！

▼ 小鼠PDX模型优势

在肿瘤研究中，环特鼠PDX模型作为一种优秀的体内药效模型，实现稳定性与效能融合，在筛选受试药物、适应症确定、机理研究等方面具有一系列优势：

● 同批次样本均质化建模；  ● 稳定性与同代传代一致性；  ● 早期均匀生长，优选药效实验窗口

 环特小鼠PDX应用 

▼ 小鼠PDX模型列表（部分）

▼ 用于肿瘤免疫研究

将环特鼠PDX体内药效模型与PBMC（即外周血单个核细胞）免疫系统人源化模型相结合，也是肿瘤免疫研究的理想模型。两者的融合可以实现对多种状态下病人来源的十余种肿瘤进行研究，有助于提高对恶性肿瘤治疗的认知，包括作用靶点及机制等，实现药物优化及提高临床的治疗效果，为研究人员提供了更全面、更真实的研究视角。

患者原代肿瘤细胞与PBMC共培养杀伤-免疫疗法体外药效评价，是通过将环特鼠PDX体内药效模型与PBMC免疫系统人源化模型相结合，来获取临床手术样本及患者外周血、消化肿瘤细胞，与患者免疫细胞共培养杀伤，检测免疫疗法在不同患者中的药效，并精准检测肿瘤细胞凋亡/死亡情况，是肿瘤免疫研究的理想模型。

如下图，体外检测临床结直肠癌患者及卵巢癌患者，不同的患者PD-1药效存在差异。

▼ 仿临床药效评价

小鼠PDX模型，保留了肿瘤组织原有的非肿瘤基质和微环境，能够保持肿瘤原有特性和异质性，更贴近临床患者肿瘤的原代细胞，可以提供更加可靠和真实的肿瘤生长环境，具有仿临床药效评价能力，可有效预测患者对特定药物的反应。

例如，最近的多项研究中均成功构建了小鼠PDX模型，并观察到小鼠PDX实验结果与临床结果之间的高度一致性。实验结果显示，小鼠PDX模型随着传代受到固定的筛选压力（下图1）；模型的CNA变化随着代次的增加逐步加大（下图2）；这种变化是由于特定细胞亚群增加或减少/丢失导致的（下图3）；减少细胞亚群丢失、减少不同小鼠间的异质性、减少传代次数，有助于提高PDX模型与临床患者肿瘤的一致性。

▼ 筛选新抑制剂/抗体/ADC耐药性模型

小鼠PDX模型，对特定药物的反应与临床用药效果相比有高度的相似性，可用于评估新药的疗效及安全性，筛选新抑制剂/抗体，判断ADC耐药性等，为临床试验的设计提供重要依据。

如下图，在小鼠PDX肺癌及肝癌模型中筛选AZD9291和DS8201耐药性，在长期使用会降低对恶性肿瘤的治疗效果。

▼ PBMC-NK双人源化药效评价

环特小鼠PDX模型，生长均匀，稳定建模，生长稳定性接近CDX模型，可体现出临床情况下低靶点阳性细胞率对药效的影响。PBMC-NK模型中，NK杀伤能够达到同靶点T细胞杀伤水平，肿瘤及免疫系统重建稳定，试验期间内GVHD可控。

如下图，利用小鼠PDX模型开展药效评价、免疫重建等，取得了较好的效果。

▼ 基于临床样本测试新药有效性

使用病人肿瘤组织构建的小鼠PDX模型，可基于临床样本，替代肿瘤患者对不同的新药开展体内药效学检测，测试新药有效性，是试药的完美替身。

 环特小鼠PDX平台简介 

环特小鼠PDX平台，依托于“类器官+基因编辑+哺乳动物+斑马鱼”SciPro™多元化，已成功构建了10多种鼠PDX模型，为肿瘤药效评价领域带来了稳定性与效能的完美融合。随着技术的不断进步和研究的深入，环特小鼠PDX模型将在肿瘤免疫研究、抗肿瘤药物筛选和评估、临床用药指导等方面取得更广泛的应用，为肿瘤研究与治疗带来更大的突破！

环特生物致力于为客户提供高质量的小鼠PDX模型，助力肿瘤研究，开创药效评价领域的创新时代！

▼ 资 质 荣 誉

环特已拥有实验动物生产与使用双许可证，通过CNAS、CMA和AAALAC认证，自有10300m²实验室。

环特在技术研发与应用领域，已牵头起草发布团体标准17项，申请发明专利81项，自主开发斑马鱼模型170多种，大小鼠模型200多种，发表SCI及核心期刊论文220多篇，已有7个新药项目成功将环特斑马鱼实验数据用于NMPA（国家药监局）的临床试验申报，累计完成项目20000多个，长期合作客户800多家。

 项 目 咨 询 

更多小鼠PDX技术服务项目，请拨电话咨询：0571-83782130，手机 17364531293（微信同号）。

【评价原理】

蛋黄粉中含有大量的脂肪、胆固醇和卵磷脂等。由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统，如肝脏、肠道等，消化和营养的吸收及运输与人类高度相似。用蛋黄粉喂饲斑马鱼，相当于摄入了大量脂肪。

经过脂肪特异性荧光染色（呈红色），摄入大量蛋黄粉的斑马鱼的肠道和血管会明显比正常斑马鱼的肠道和血管要红很多，由于斑马鱼通体透明的特点，可以明显被观察到。

【实验方案】

受测试斑马鱼均摄入蛋黄粉（蛋黄粉通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内），饲喂数天后，我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和服用抑脂产品组服用抑脂产品组摄入奥利司他之类的抑脂产品。

服用一段时间抑脂产品后，我们对斑马鱼做脂肪特异性染色，观察肠道和血管中的脂肪变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼肠腔和血管中的脂肪染色表型图

虚线及箭头表示染色后的脂肪区域，区域内红色代表脂肪

可以看到，服用抑脂产品组肠腔和血管中脂肪较少，未出现模型对照组明显脂肪沉积的情况。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用抑脂产品组肠腔和血管中脂肪较少，未出现模型对照组肠腔和血管中明显脂肪沉积的情况。

2.本实验证实了奥利司他具有明显抑脂功效。

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【评价原理】

由于斑马鱼拥有与人类相似的消化系统，如肝脏、肠道等，消化和营养的吸收及运输与人类高度相似。斑马鱼的卵黄囊70%左右是中性脂肪，如果能够促进斑马鱼卵黄囊的吸收，就相当于可以促进脂肪的分解和代谢，类似于体内脂肪燃烧。

经过脂肪特异性荧光染色（呈红色），斑马鱼的卵黄囊被染红，可以明显被观察到。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组和服用燃脂产品组。其中正常对照组未摄入其他物质，服用燃脂产品组摄入了白藜芦醇之类的燃脂产品（燃脂产品通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

服用一段时间燃脂产品后，我们对斑马鱼卵黄囊做脂肪特异性荧光染色，观察卵黄囊的脂肪颜色变化。

【结果展示】

图1. 斑马鱼卵黄囊脂肪表型图

黄色虚线区域为斑马鱼卵黄囊

可以看到，服用燃脂产品的斑马鱼卵黄囊荧光强度与正常对照组明显减弱。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用燃脂产品组卵黄囊荧光强度与正常对照组比较明显减弱。

2.本实验证实了白藜芦醇具有明显燃脂（促进脂肪代谢）功效。

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【评价原理】

便秘的主要表现是排便次数减少和排便困难。斑马鱼是一种与人类同源性较高的脊椎动物，它的肠道组成与人类相似，具有内皮细胞、结缔组织、环状肌肉和外纵肌层。硫酸铝能减少肠道蠕动，诱发斑马鱼便秘。

经过喂食不被肠道吸收的特异性荧光材料，可以明显的观察到被便秘斑马鱼肠道蠕动减慢，肠道内的荧光强度明显比正常斑马鱼亮。

【实验方案】

我们将受测试斑马鱼分成三组，分别是正常对照组、模型对照组和服用通便剂组。服用通便剂组提前服用一段时间吗丁啉、派立清口服液和慈素粉之类的通便剂后，正常对照组、模型对照组与服用通便剂组都摄入了等量荧光材料。荧光材料摄入后，正常对照组不做任何处理，模型对照组和服用通便剂组都摄入了等量硫酸铝（荧光材料和硫酸铝通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。

服用一段时间通便剂后，我们在荧光显微镜下观察斑马鱼肠道荧光强度。

【结果展示】

图1. 斑马鱼肠道荧光强度表型图

可以看到，服用通便剂组的肠道荧光强度较模型对照组明显减弱。

【评价结论】

1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用通便剂组的肠道荧光强度较模型对照组明显减弱。

2.本实验证实了吗丁啉、派立清口服液和慈素粉等具有明显通便功效。

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