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  单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1),也称CCL2,是吸引单核细胞、记忆性T细胞和树状突细胞到组织损伤和感染部位有重要作用的炎症细胞因子。 MCP-1通过脂肪组织的炎症反应(巨噬细胞浸润)参与肥胖症和胰岛素抵抗。 另外, MPC1可在风湿性关节炎人群的关节中找到,以吸引巨噬细胞使炎症持续。   A. 优点:   · 性价比高---高质量,低价格。   · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。   · 特异性强---优选高度特异的针对人MCP-1的配对抗体。   · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统   B. 原理:   MCP-1试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人MCP-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗人MCP-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品MCP-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。MCP-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。

  凋亡涉及一系列生化活动,这些活动导致特征性的细胞形态和死亡,包括细胞膜的变化、细胞收缩、核碎裂、染色质浓缩、染色体DNA断裂。在发育期和肌体平衡期,把不要的细胞除去是非常重要的。过渡凋亡引起营养不足,如脑缺血损伤;不充分的凋亡导致细胞增殖失控。MicroRNAs (miRNAs)是非编码的小RNA分子,调控30%哺乳动物基因的表达。许多miRNAs对凋亡细胞信号调控有影响,如miR-145、miR-216、miR-182、miR-96 miRNAs的过渡表达导致天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3的活性下降。中帜生物公司开发的miRNA阵列试剂检测凋亡相关的47种miRNAs。检测这些miRNAs的表达有助于揭示凋亡的miRNAs调控机制。   A.优点:   中帜生物凋亡相关的miRNA微孔板阵列试剂是一种直接杂交总RNA的一种方法,具有下列优点:   ·操作简单——检测48种miRNA的表达如ELISA试验一样简单,无需用酶转换miRNA成cDNA,检测步骤只是孵育和洗涤   ·灵敏度高——较miRNA Northern blotting分析敏感100倍   ·分辨力强——在分辨同源miRNA 时,较Northern blot有更高的分辨力   ·差别定量——二个或更多标本miRNA表达的差异可定量分析   B.原理:   中帜生物的miRNA直接杂微孔板交阵列方法是简单的二步法。板杂交和链霉亲和素-辣根酶检测。微孔板包被上oligo mix,其包括一对oligo—与特定靶miRNA并列杂交的相应oligo、通用捕获oligo和生物素标记oligo。该方法中,总RNA直接用于杂交。当RNA中存在靶miRNA时,其做为桥将生物素标记的oligo与捕获oligo连接起来,这样可以通过链霉亲和素辣根酶结合物以及化学发光底物检测。如果不存在靶miRNA时,生物素标记的探针就被冲洗掉,因此无检测信号。在微孔板阵列中,48个孔包被上不同的oligo mix来检测不同的miRNA,96孔板可定量测定和比较二个样品中48种miRNA,U6用于标化。

  研究基因表达常常需要RNA制备后再进行cDNA合成和PCR。不过要获得用于RNA制备的大量细胞之困难成为一些研究工作的瓶颈,如激光切割的样本,FACS分拣的细胞和在96孔板中培养的细胞。细胞数量有限(

  miR-21 在各种Ca症中出现过度表达,被认为是下调肿抑制因子的Ca基因,包括程序性细胞死亡4 (PDCD4)、肿抑制因子Pdcd4、PTEN 肿抑制基因和肿抑制基因的原肌球蛋白1 (TPM1)。miR-21 是Ca细胞生存的重要调节因子,与抗凋亡蛋白表达激活的IL-6/Stat3介导的生存通路不同,miR-21由Stat3上调,通过抑制TPM1 和/或其它蛋白介导凋亡的抑制。中帜生物研发的miR-21微孔板检测试剂提供了一种分析miRNA分子一种简便快速的方法。   A.优点:   中帜生物基于其自有专利技术的miRNA微孔板检测试剂具有下列优点:   ·操作简单——做miRNA试验象做ELISA试验,无需用酶转换miRNA成cDNA,检测步骤只是孵育和洗涤   ·灵敏度高——较miRNA Northern blotting分析敏感100倍   ·分辨力强——在分辨同源miRNA 时,较Northern blot有更高的分辨力   ·差别定量——二个或二个以上样本的miRNA簇表达的差异可定量分析   B.原理:   基于自有专利miRNA微孔板检测中,一个miRNA分子通过二个连接oligos与捕获ologo和生物素化的检测oligo连接,一个连接oligo与捕获oligo和待测的miRNA部分杂交,另一个连接oligo与检测oligo和待测的miRNA另一部分杂交,杂交体通过与固相化的捕获oligo杂交固者在微孔板上,再由辣根酶标记链酶亲和素和发光底物检测,这种杂交体结构对miRNA分子序列非常敏感,一个核苷酸的差异即会阻止杂交体的形成,从而可分辨同源miRNA,而Northern blot则很难鉴别同源miRNA,此外该方法的敏感性较Northern blot高。捕获的miRNAs进一步用辣根酶标记的亲和素检测,发光信号的强度用发光仪检测,miRNAs表达水平直接与发光度值成正比。

  NFkB 是一种广泛存在的转录因子,在细胞对各种刺激的反应中起着重要作用,这些刺激包括:压力、细胞因子、自由基、紫外线照射、氧化的LDL、细菌和病毒的抗原。NFkB的异常调节与炎症、自身免疫性疾病、脓毒性休克、病毒感染和不适当的免疫进展相关联。激活时NFkB参与免疫和炎症反应、细胞调节以及凋亡的相关基因的表达。为了方便在少量细胞中监测与细胞生物功能相关基因的表达, 美国Signosis公司研发了一种直接在细胞裂解物中或总RNA中分析8种NFkB调节基因实时PCR方法。   A. 优点:   Signosis公司NFkB调控基因的实时PCR检测试剂具有以下优点:   ·便利---从细胞裂解、反转录直到PCR,试剂盒包含了所有试剂。   ·无需RNA制备---细胞裂解液可直接用于反转录。   ·实时---分析可以实时监测   B. 原理:   Signosis公司实时PCR检测试剂通过mRNA反转录成cDNA以及实时PCR监测8种因子的表达,纯化的总RNA或细胞裂解物先反转录成cDNA,靶基因再通过实时PCR分析。

  炎症是由于微生物病原感染、化学刺激和/或外伤造成组织损伤时的一种生理反应过程。在急慢性炎症过程中,各种白细胞、淋巴细胞及其它炎性细胞被激活,通过由各种生长因子、细胞因子和趋化因子参与的信号网络吸引到炎症部位。美国Signosis公司研发的cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种炎症基因表达。   A. 优点:   美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的小鼠炎症cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:   ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。   ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。   ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。   B. 原理:   美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。

  Wnt信号通路对胚胎发育生成非常重要。β-Catenin,通路的中心部分,做为转录因子TCF/LEF家族的辅因子进行活动,通过与下游靶基因启动子结合激活Wnt靶基因的转录参与细胞增殖、生存和转移。许多蛋白包括APC和Axin参与Wnt信号通路的调控。美国Signosis公司Wnt/b-Catenin信号通路cDNA微孔板阵列试剂可同时测定20多个参与此通路的相关基因表达。不同样本这些基因表达差异可应用该试剂盒进行测定。   A. 优点:   美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人Wnt/b-Catenin调控的cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:   ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。   ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。   ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。   B. 原理:   美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。

  T细胞是一类在免疫反应中起着重要作用的淋巴细胞。T细胞受体是一种合成体蛋白,参与T细胞抗原应答时的激活,这种激活需要受体合成体亚单位和其它膜分子,使细胞外受配体反应与下游的信令通道结合,如肌酸磷酸的增加,细胞外钙水平和蛋白磷酸化增高。TCR激活促成许多信号级联反应,通过调节细胞因子的产生、细胞生存、增殖和分化,最终确定细胞的命运。美国Signosis公司人T细胞受体信令cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种相关基因。   A. 优点:   美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人T细胞受体信令cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:   ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。   ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。   ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。   B. 原理:   美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。

  要明确与特定启动子结合的转录因子(TFs),或明确是通过上游的启动子调控特定基因表达的转录因子,常用二种方法。一种,启动子内电识别的转录因子DNA结合位点进行凝胶迁移试验。第二种,除去或移除某个转录因子的结合位点,以测定与启动子连接的报告体的表达是增加还是减少,通常,要构建一系列启动子缺失或突变的报告体,因为一个或一些转录因子在启动子上有多个结合位点。美国Signosis 公司开发了一种快速方法,通过一种变换的TF检测微孔板阵列方法便于启动子的定性,这种方法将检测48种TF是否与启动子结合。   A. 优点:   美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的结合启动子的TF微孔板阵列检测试剂,具有下列优势:   · 多重复合---单一一次试验可明确48种TF与特定启动子的结合   · 步骤简单---探针孵育、柱离心、板杂交和HRP检测   B. 原理   启动子的TF微孔板阵列检测试剂是Signosis转录因子活性检测微孔板阵列试剂I的竞争法。在转录因子活性检测微孔板阵列试剂I,如果48种靶转录因子存在于待测样品中,就会形成48种类型的复合物,每种转录因子带有相应的生物素标记的oligo(与凝胶迁移试验中的复合物一样),用柱离心从复合物中分离未结合的游离的生物素标记的oligo,柱洗脱转录因子结合的oligo,用于板杂交,杂交上的DNA有生物素标记oligo,捕获的oligo用链酶亲和素和化学发光底物检测。如果不存在转录因子,就不能形成复合物,在随后的生物素标记的oligo中检测不到TF。在结合启动子的TF微孔板阵列检测试剂中,含有感兴趣的启动子PCR片段,与一套48种生物素标记的oligo混合,48种oligo与待测标本中的48种TF对应。如果DNA片段含有TF结合序列,就与生物素标记的oligo竞争与样本中的TF结合,不形成或少形成复合物,也就检测不到或少检测到TF,通过竞争质粒或DNA片段的存在与否,启动子结合的TF可被识别。

  凋亡是一种程序性细胞死亡过程,包括细胞质浓缩,细胞收缩,染色质浓缩,膜空泡化,核脆裂,形成凋亡小体,在此过程中,发生一系列的生化反应,如细胞内蛋白酶的激活,凋亡相关基因调节的激活。美国Signosis公司凋亡相关cDNA微孔板芯片检测试剂为检测凋亡调节基因的表达提供了一种简便的方法。人凋亡cDNA微孔板阵列检测试剂是基于微孔板阵列的方法,可检测20 多种凋亡相关的基因表达。   A. 优点:   美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的凋亡cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点:   ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。   ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。   ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。   B. 原理:   美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。