检测基因表达常常需要有许多步骤，RNA制备、反转录和PCR。为简化基因表达分析，美国Signosis研发了一种多生物素信号放大技术(MBSA)，基于这项技术，基因表达可以直接用细胞裂解物测定而无需RNA制备、反转录和PCR。美国Signosis已经研发了定量测定TNF和IL-6检测试剂，现在可以提供定量测定各种基因mRNA微孔板检测的定制服务，只需客户提供基因信息如基因的ID，即可提供完整的检测试剂。 　　A. 优点： 　　美国Signosis mRNA微孔板定量检测试剂具有下列优势 　　· 准确定量---mRNA用体外的RNA做参照，进行定量测定。 　　· 灵敏度高---在较宽的动力学范围内可测定少至500个分子。 　　· 操作简单---细胞裂解物或总RNA可直接用于板杂交，其无需总RNA制备和mRNA到cDNA的酶促转换， 整个检测步骤主要是“孵育和洗涤”。 　　B. 原理： 　　在MBSA中，多生物素加到聚合物上，其含有标识的互补序列，可以与连接序列结合。连接序列含有靶序列和标识序列。一条连接序列具有共同的标识序列，但带有不同的靶序列以与靶基因不同区域杂交。因此具有二个层级的放大：多个区域和多个生物素。RNA微孔板检测结合MBSA，靶mRNA通过多个捕获oligo捕获在微孔板上，捕获的RNA分子与多个连接分子杂交，靶定mRNA不同区域，MBSA随后与连接分子杂交，捕获的生物素分子用链霉亲和素酶结合物及发光底物检测。

　　转化生长因子β1 (TGF-ß1)基因编码的一种多功能细胞因子，调控许多细胞的增殖、分化和其它功能，细胞包括周围的基质细胞，免疫细胞，内皮细胞和平滑肌细胞。TGF-ß1引起免疫抑制和血管形成。通常以炎症(免疫)反应攻击症的效应T细胞，TGF-ß将其转换成调节(抑制) T细胞而关闭炎症反应。TGF- β导致许多类型的细胞凋亡。TGF-β可作用于脂肪前体细胞。TGF- ß1证明是成脂肪细胞系分化的一种强抑制剂。另外，分化缺陷、来自于成脂肪细胞系1246的胰岛素非依赖性系源细胞在条件培养基上产生TGF- ß1样的多肽，以一种自分泌的方式调节细胞分化能力。TGF-b1表达的增加与体重指数和疾病所致肥胖的腹部脂肪组织有关。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对人TGF-ß1的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理： 　　TGF-ß1试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人TGF-ß1抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的鸡抗人TGF-ß1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测，待测样品TGF-ß1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。TGF-ß1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。 　　A. 优点： 　　· 性价比高——高质量，低价格 　　· 高效灵活——多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量 　　· 特异性强——优选高度特异的针对人TGF-ß1的配对抗体 　　· 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理： 　　TGF-ß1试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人TGF-ß1抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的鸡抗人TGF-ß1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测，待测样品TGF-ß1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。TGF-ß1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。

　　髓过氧化物酶 (MPO)是白细胞活化时由嗜中性粒细胞和单核细胞的颗粒释放的，在宿主防御系统和炎症情况下起重要作用。 炎症与急性冠脉综合症的不良后果有关。髓过氧化物酶是一种丰富的白细胞的酶，在由于心脏原因而突然死亡的撕裂性损伤患者中增高。 增高的MPO水平与冠脉疾病相关。 在动脉粥样硬化，动脉壁硬化， 动脉粥样化区域可找到高浓度的MPO及其氧化产物 。 MPO与脆弱的斑块和内皮细胞的功能不良有关。 在胸痛住院的患者，高血清和血浆MPO水平表明高风险的心血管事件。 低CRP和TnT水平，高MPO水平的病人比有低CRP、TnT和MPO水平的病人具有更大的心脏病风险。 心肌受损之前高水平的MPO以及水平不断增加表明不稳定的斑块形成，因此MPO水平是潜在心脏病事件良好的预报因子。 　　A. 优点： 　　· 性价比高---高质量，低价格 　　· 高效灵活---多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量。 　　· 特异性强---优选高度特异的针对MPO的配对抗体。 　　· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 技术原理 　　MPO 试剂为固相酶免法。 方法采用针对MPO不同抗原决定簇的鼠单克隆抗体做为微孔板中的固相捕获抗体，辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗MPO单克抗体做检测抗体， 待测样品中的MPO可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后，洗去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB，产生蓝色反应， 加入终止液后转成黄色。 MPO的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。

　　基因表达是在单个细胞水平进行调控，需要有多种方法分析单个细胞如干细胞、神经元、发育组织、激光捕获切片的基因表达方式。SYBR Green 是最广泛应用的双链DNA特异染料，是实时PCR报告染料。Signosis公司研发了一种单个细胞的SYBR Green实时RT-PCR试剂，不需要RNA制备，而是直接用细胞裂解物。该试剂盒是一种敏感、定量、价廉的方法，用以实时监测PCR反应。除了CLTM细胞裂解液试剂盒包括cDNA合成和PCR扩增的所有试剂。 　　A. 优点： 　　美国Signosis公司直接用细胞裂解液的RT-PCR试剂具有以下优点： 　　·便利---从细胞裂解、反转录直到PCR，试剂盒包含了所有试剂。 　　·无需RNA制备---细胞裂解液可直接用于反转录。 　　·功能强大---该试剂可获得全长的cDNA。 　　·实时---分析可以实时监测 　　B. 原理： 　　缓冲液已优化适于进行细胞裂解物制备和RT-PCR。

　　转录因子(TFs)是一组细胞蛋白，在调控基因表达中起着重要作用，其做为传感器，监测细胞的变化，把信号转变成基因表达。一种特定的细胞信号通道通常可以同时激活多种转录因子，一种特定基因的表达在多种转录因子的控制之下，因此同时检测多种转录因子的活性对理解潜在于细胞信号传导和基因表达之中的细胞调控的分子机制至关重要。美国Signosis 公司TF活性检测微孔板阵列试剂II用于检测96种不同TFs的活性，包括NFkB、AP1、HIF1和p53。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的TF活性检测微孔板阵列试剂，具有下列优势： 　　· 多重复合---单一一次试验可测定96种TFs的活性 　　· 定量比较---二个样本的差异可以定量分析和比较 　　· 步骤简单---探针孵育、柱离心、板杂交和HRP检测 　　· 无需特殊仪器---无需贵重仪器如Luminex 　　B. 原理 　　TF活性检测微孔板阵列试剂用于同时检测多种转录因子的活性。本技术中，基于TF-DNA结合位点的一致性序列，制备一系列生物素标记的探针，探针混合物与核抽提物混合，通过柱离心纯化，各探针指向其相应的TF，形成TF/探针复合物，通过柱离心纯化，可以方便的与游离探针区分开来。通过板杂交，结合的探针从混合物中分离并分析，每一板孔特定的预包被上相应的探针序列。

　　肥胖症增加代谢综合症、高血压、动脉粥样硬化和血栓形成的风险。 许多蛋白被认为是肥胖与代谢综合症和心血管疾病发展的相关蛋白，这些蛋白的血浓度一般用ELISA检测。为检测这些蛋白的作用，美国Signosis开发出复合酶免法平行检测试剂同时测定8种蛋白质的血浆浓度，这8种蛋白是肿瘤坏死因子—a，白介素-6，干扰素-r，白介素-1a，白介素-1b，单核细胞趋化蛋白-1，血管生成因子和瘦素。二个样品之间蛋白质的区别可以通过数据比较加以测定，因此有助于发现不同样本中这些蛋白的变化。 　　A. 优点: 　　· 多种复合---单一板条可同时测定8种肥胖症生物标记物 　　· 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 　　· 差别定量---不同于膜芯片方法，样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外， EA-1222为做标准曲线提供标准品。 　　· 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法，勿需贵重仪器 　　· 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统 　　B. 原理 　　板条每个孔包被有针对肥胖症生物标记蛋白的特异抗体，8个孔包被有8不同抗体，一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应，肥胖症生物标记蛋白夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后，洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB，产生蓝色反应，加入终止液后转成黄色。 肥胖症生物标记蛋白的浓度与待测样品颜色深浅成正比。 450 nm处测定吸光值进行定量。

　　白介素-4 (IL-4)是有许多生物学作用的细胞因子，包括刺激激活的B细胞和T细胞增殖以及CD4+ T细胞分化为Th2细胞，是体液免疫和适应性免疫的一个重要调控者。 IL-4与细胞表面受体复合物结合，该复合物由IL-4结合蛋白 (IL-4R a)和IL-2受体复合物的r链(r c)组成。 　　A. 优点： 　　· 性价比高---高质量，低价格。 　　· 高效灵活---多个样品可同时分析，灵活确定分析试样的数量。 　　· 特异性强---优选高度特异的针对人IL-4的配对抗体。 　　· 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统. 　　B. 原理： 　　IL-4试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人IL-4抗体做为微孔板的固相捕获抗体，生物素标记的兔抗人IL-4抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测， 待测样品IL-4夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应，随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后，洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物，产生蓝色反应， 加入终止液后转成黄色。IL-4的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比，450 nm处测定吸光值进行定量。

　　YY1在正常的生物学过程中如胚胎发育、分化、复制和细胞增殖中发挥着重要作用。YY1通过与启动子区的YY1识别位点(一致性序列)结合的过程发挥作用。YY1功能异常与细胞增殖异常、凋亡有关。美国Signosis 公司研发的YY1滤板法检测试剂用于检测YY1的DNA结合活性，可同时分析多个标本。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司基于自有知识产权技术研发的YY1滤板法检测试剂，具有下列优势： 　　· 简单快速---比凝胶迁移试验简单、快速 　　· 高通量筛选---多个样品可在一个试验中得到分析 　　· 费用低廉---与基于ELISA的检测方法相比花费更少 　　· 定量比较---二个或以上样本可同时定量分析 　　B. 原理 　　美国Signosis 公司研发的YY1滤板法检测试剂，是基于微孔板检测YY1活性的分析方法，预标记YY1的DNA结合序列与核抽体物混合，形成YY1-DNA复合物。过滤板用于保留结合的YY1探针，除去游离的DNA探针。结合的预标记的YY1探针随后从过滤板上洗脱、收集，与相应孔的杂交板杂交。捕获的YY1探针进一步用辣根酶标记的链霉亲和素检测，在微孔板发光检测仪上读取发光度值(RLUs)。

　　细胞因子是信号分子，在细胞生长、分化、基因表达、迁移、免疫和炎症的许多生物过程中发挥重要的作用。细胞因子由细胞分泌，与细胞表面受体结合，激活细胞信号传导通路，传递细胞间的讯息。细胞因子的功能异常导致许多疾病，如关节炎、急慢性肝病、肠炎、心脏相关疾病。许多细胞因子常常涉及一种生物学或疾病过程。因此全面分析多种细胞因子的表达可以有效揭示疾病的潜在机制。人细胞因子微孔板阵列试剂以高通量的方式同时监测31种人类细胞因子，该方法快速敏感的同时定量检测不同样本多种细胞因子的水平。 　　(详见：http://www.zhongzhibio.com/kysj/423.htm) 　　A. 优点: 　　· 多重复合—— 一次ELISA试验可同时测定3份样品的31种细胞因子 　　· 敏感性高——只需少量样本 　　· 勿需贵重仪器——与珠式方法不同，不需要贵重仪器 　　· 操作简单—— 试剂盒包括预包被板等所有组分 　　B. 原理： 　　96孔白板分成3个区，每个区有4列，每个区31种特异的细胞因子捕获抗体分别包被在31个孔，1孔未包被任何抗体用作空白对照。样品如细胞培养悬液、细胞裂解液、组织匀浆、血清或血浆样品与微孔板温育，捕获的细胞因子蛋白用混合的生物素化抗体同时检测，待测样本与捕获抗体和检测抗体结合温育后，洗涤除去未接合的标记抗体，加入酶及TMB底物，产生蓝色变化，加入终止液变成黄色，细胞因子的浓度与呈色的强度成正比，测定450nm的吸光度值。 　　A. 优点: 　　· 多重复合—— 一次ELISA试验可同时测定3份样品的31种细胞因子 　　· 敏感性高——只需少量样本 　　· 勿需贵重仪器——与珠式方法不同，不需要贵重仪器 　　· 操作简单—— 试剂盒包括预包被板等所有组分 　　B. 原理： 　　96孔白板分成3个区，每个区有4列，每个区31种特异的细胞因子捕获抗体分别包被在31个孔，1孔未包被任何抗体用作空白对照。样品如细胞培养悬液、细胞裂解液、组织匀浆、血清或血浆样品与微孔板温育，捕获的细胞因子蛋白用混合的生物素化抗体同时检测，待测样本与捕获抗体和检测抗体结合温育后，洗涤除去未接合的标记抗体，加入酶及TMB底物，产生蓝色变化，加入终止液变成黄色，细胞因子的浓度与呈色的强度成正比，测定450nm的吸光度值。

　　转录因子(TF)是一组控制基因表达的细胞蛋白。TF一旦被激活，就与启动子区的顺式作用元件结合，参与靶基因的表达。凝胶迁移试验(EMSA)是一种常用的体外监测TF激活的方法。基于知名文献选出转录因子一致性序列，将其做为检测人、小鼠、大鼠TF活性的探针。美国Signisis的每种EMSA试剂盒是一种即用试剂，包括了所有试剂和转印的膜。 　　A. 优点: 　　美国Signosis 公司凝胶迁移试验试剂，具有下列优势： 　　· 勿需同位素---基于化学发光检测 　　· 勿需制备探针---已制备好生物素预标记的探针 　　· 步骤简单---方法简单、流畅 　　B. 原理 　　TF激活时，与生物素标记的探针结合，探针是根据TF结合的一致性序列进行设计。形成的复合物进行电泳，将比游离探针跑得慢，因此可以很容易辨别。二个或更多样本可通过迁移试验比较，其差异可根据迁移条带的密度加以确定。