白介素 12 (IL-12)是有许多重要作用的白介素,包括NK细胞和T淋巴细胞的激活,初始T细胞分化为Th1细胞, T细胞生长和功能化, T细胞和自然杀伤细胞(NK) 产生干扰素r(IFN-r) 和坏死因素-a (TNF-a),IL-4介导的对IFN- r的抑制。IL-12 通过增加IFN- r的产生,反过来增加IP-10的产生,在抗血管生成活性中起重要作用。 IL-12是在对抗原刺激应答时由树状细胞、巨噬细胞和人B-淋巴母细胞系细胞自然产生。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人IL-12的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统. B. 原理: IL-12试剂为固相酶免法。 方法采用羊抗人IL-12抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-12抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品IL-12夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。IL-12的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
过氧化体增殖物激活型受体-α(PPAR-α)在细胞分化、发育、代谢(碳水化合物、脂质、蛋白)和肿瘤发生中起着重要作用,PPAR-α是一种核受体蛋白,做为转录因子调控基因表达,其可以与其它许多共调节物如P300,TRIP3相互作用调控着下游基因的表达。美国Signosis提供的PPAR-α免疫共沉淀试剂盒包括带Myc标签的PPAR-α表达载体,其可用于分析PPAR-α和PPAR-α相关蛋白之间的相互作用。 A. 优点: PPAR-α免疫共沉淀试剂盒具有下列优势: · 蛋白相互作用的功能性检测方法——可用于RXR与其它蛋白的相互作用。 · 噪音低——WB检测时非特异信号非常低。 · 结果一致性高——磁珠易于通过磁架分离,少而快的洗涤无样品丢失。 · 快速——蛋白用抗Myc磁珠沉淀,无需预分离步骤,缩短孵育时间。 · 简便——试剂盒包含全部试剂组份。 B. 原理: Myc标签的PPAR-α表达载体用于转染靶细胞。转染后,PPAR-α表达Myc抗原决定部位标签,与反应蛋白结合。PPAR-α复合物与相应蛋白可以快速高效的与抗Myc抗体免疫共沉淀,共沉淀复合物通过磁力架进一步与未结合的蛋白分开,洗涤后,复合物高效彻底的从磁珠上洗脱下来,用SDS-PAGE分离以进一步WB分析。磁珠上固相的Myc抗体在低PH洗脱条件下通过阻止轻链和重链的解离提供更好的WB检测。
血管形成从无血管状态转变成有血管状态是生长维持的一个关键因素。 血管形成作为一种生物学的转换过程由促进和抑制血管形成的许多因素控制,包括血管内皮细胞生长因子(VEGF), 碱性成纤维细胞生长因子(FGFb),表皮生长因子(EGF)和促生长因子b(TGF-b)。 这些因子的作用机制是不同的,就象它们的来源和它们产生的刺激物一样。 血管形成的转换通常是促进和抑制血管形成因素之间的平衡结果。所以,描绘这些因素对了解血管形成至关重要。 美国Signosis 8种血管生成细胞因子复合酶免法平行检测试剂可同时检测8种血管形成细胞因子:TNFa、IGF-1、VEGF、IL-6、FGFb、TGFb、EGF和Leptin。板条每个孔包被有针对血管形成蛋白的特异抗体,一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。二个样品之间蛋白质的区别可以通过数据比较加以测定。 A. 优点: · 多种复合---单一ELISA板条可同时测定8种血管形成细胞因子 · 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 · 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA- 1012为做标准曲线提供标准品。 · 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器 · 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统. B. 原理 板条每个孔包被有针对血管形成细胞因子的特异抗体,8个孔包被有8不同抗体,一个板条8个孔可测定8不同细胞因子。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应,血管形成细胞因子夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。450 nm处测定吸光值。 血管形成细胞因子的浓度与待测样品颜色深浅成正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
IL-6最初被认为是B细胞分化因子,现在认为是多功能的细胞因子,可调控免疫反应、造血、急性相反应和炎症。IL-6由激活的T细胞、巨噬细胞、上皮细胞、成纤维细胞和成骨细胞产生。IL-6产生的失调意味着一些疾病过程的病理,如自身免疫性疾病和慢性炎症性增殖性疾病。因此监测这些细胞因子的表达是分析这些疾病潜在分子机制的常用方法。美国Signosis研发了一种多生物素信号放大技术(MBSA),该技术比基于单生物素检测的方法敏感1000倍。应用MBSA,美国Signosis研发了人IL-6 mRNA微孔板定量检测试剂,该试剂可直接定量测定细胞裂解液和总RNA中IL-6基因的表达。 A.优点: 美国Signosis mRNA微孔板定量检测试剂具有下列优势: · 准确定量---IL-6 mRNA应用体外RNA中的IL-6做参比。 · 敏感性高---可测定低至500个分子,并具有较宽的线性范围。 · 操作简单---总RNA直接用于板杂交,勿需酶转换mRNA成cDNA,方法步骤是“孵育和洗涤”。 B. 原理: 在MBSA中,多生物素加到一个聚合物上,其序列有标示互补序列可与连接序列杂交,连接序列含有靶序列和标示序列。各连接序列的标示序列相同,但会有不同靶序列与靶基因不同区杂交,因此是在二个层级上放大---多个区和多个生物素。mRNA微孔板定量检测试剂应用了MBSA技术,靶mRNA通过捕获oligo捕获到微孔板上,捕获的mRNA分子与许多连接序列杂交,从而靶定mRNA的不同区,多生物素随后与连接序列杂交,捕获的生物素分子用链酶亲和素辣根酶结合物与发光底物检测。
白介素-6 (IL-6)是调控免疫反应、造血、急性相反应和炎症的一种多功能细胞因子。IL-6产生的下调涉及到几种疾病过程的病理学。在几种疾病观察了它的水平,包括风湿性关节炎(RA)。IL-6以促炎和抗炎细胞因子发挥作用,由T细胞和巨噬细胞分泌刺激免疫反应。另外,IL-6象TNFa一样也许是介入胰岛素抵抗的另一种脂肪细胞分泌产物。IL-6是许多细胞分泌的细胞因子,包括脂肪细胞和脂肪基质细胞。IL-6的分泌在肥胖者的脂肪细胞是增加的,作为一种循环激素或胰岛素活动的局部调节剂也许有其重要性。IL-6涉及肥胖者胰岛素抵抗的发展。象TNF,IL-6抑制LPL表达,但是不同于TNF,IL-6不刺激脂肪分解。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人IL-6的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: IL-6试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人IL-6抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-6抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品IL-6夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。IL-6的浓度与待测样品的颜色呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人IL-6的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: IL-6试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人IL-6抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗人IL-6抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品IL-6夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。IL-6的浓度与待测样品的颜色呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。
肿瘤坏死因子-a (TNFa),是在急性炎症时由巨噬细胞或单核细胞产生的炎症细胞因子,负责细胞内的多种信号事件,引起坏死或凋亡。 TNFa对实体瘤生长、进展和转移的关键性血管形成也很重要。 此外, TNFa同肥胖症联系在一起,在肥胖啮齿类动物和人脂肪组织慢性升高,也许代表了肥胖和胰岛素抵抗之间的一个重要联系。 在肥胖鼠和人 脂肪组织中TNFa过渡表达。 TNFa抑制胰岛素信号,至少部分是通过阻断胰岛素受体酪氨酸激酶活性和导致胰岛素受体基体1 (IRS-1)的丝氨酸磷酸化。然而还不清楚的是肥胖症期间由脂肪细胞产生的TNF-a的生理刺激物是什么,IRS-1在细胞TNF-a处理后如何抑止胰岛素受体酪氨酸激酶的活性。 更好理解TNF-a和胰岛素信号通路之间的联系对发现肥胖症期间胰岛素抵抗状态的治疗是非常重要的。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对鼠TNFa的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 鼠TNFa试剂为固相酶免法。 方法采用羊抗鼠TNF-a抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗鼠TNFa抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品鼠TNFa夹在捕获抗体和标记抗体之间,与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。鼠TNFa的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
肿瘤坏死因子-α (TNFα),是在急性炎症时由巨噬细胞或单核细胞产生的炎症细胞因子,负责细胞内的多种信号事件,引起坏死或凋亡。 TNFα对实体瘤生长、进展和转移的关键性血管形成也很重要。此外,TNFα同肥胖症联系在一起,在肥胖啮齿类动物和人脂肪组织慢性升高,也许代表了肥胖和胰岛素抵抗之间的一个重要联系。在肥胖鼠和人脂肪组织中TNFα过渡表达。TNFα抑制胰岛素信号,至少部分是通过阻断胰岛素受体酪氨酸激酶活性和导致胰岛素受体基体1 (IRS-1)的丝氨酸磷酸化。然而还不清楚的是肥胖症期间由脂肪细胞产生的TNF-α的生理刺激物是什么,IRS-1在细胞TNF-α处理后如何抑止胰岛素受体酪氨酸激酶的活性。更好理解TNF-α和胰岛素信号通路之间的联系对发现肥胖症期间胰岛素抵抗状态的治疗是非常重要的。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对鼠TNFa的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 鼠TNFα试剂为固相酶免法。方法采用羊抗鼠TNF-α抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的羊抗鼠TNFα抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品鼠TNFα夹在捕获抗体和标记抗体之间,与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。鼠TNFα的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。
细胞因子参与许多生物活动,如病毒感染、炎症、免疫和造血。细胞因子是许多类型细胞对不同刺激反应的产物。细胞因子基因的表达由复杂的机制调控。一种细胞因子基因的表达可由多种细胞因子调控。细胞因子基因表达调控的异常可由染色体改变或导致表达机制激活或失活的病毒感染引起。因此,检测细胞因子基因表达为揭示调控的潜在机制提供了一种实用的方法。美国Signosis公司研发的细胞因子cDNA微孔板阵列检测试剂可检测20多种细胞因子基因表达。 A. 优点: 美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的小鼠细胞因子cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点: ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。
胎盘生长因子(PIGF)是与VEGF序列高度相似的双链的糖蛋白。 PIGF主要转录本有二个选择性的接合方式:PIGF-1和PIGF-2。 一些组织表达PIGF,例如甲状腺、肺和胎盘。 PIGF能诱导体内血管形成,刺激内皮细胞迁移和增殖。PlGF受体包含fms样的酪氨酸激酶(flt-1)产物。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对人PIGF-1的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: PIGF-1试剂为固相酶免法。 方法采用兔抗人PIGF-1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的兔抗人PIGF-1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测, 待测样品PIGF-1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。PIGF-1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
CA 15-3多数由腺上皮表达,特别是在哺乳期的和恶性变的乳腺表达增加 。 CA 15-3水平升高也可以是非癌的情况,例如良性乳腺或卵巢疾病、子宫内膜异位、盆腔炎和肝炎。 怀孕和哺乳期也可引起CA 15-3水平上升。 美国Signosis CA 15-3酶免试剂为CA 15-3的定量测定提供一个快速,敏感和可靠的分析方法,该试剂的灵敏度为5 U/ml。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对CA15-3的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: CA 15-3酶免试剂为固相酶免法。 方法采用针对CA 15-3不同抗原决定簇的鼠单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗CA 15-3抗体做检测抗体, 待测样品同时与捕获抗体和标记抗体反应后,CA 15-3夹在二者之间。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。CA 15-3的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。