脂联素(Adiponectin)也称GBP-28、apM1、AdipoQ和Acrp30,是人血浆水平含量较高的脂肪组织特异蛋白。据报告血浆脂联素水平在肥胖或糖尿病鼠和人中显著减少,在心血管疾病、高血压或代谢综合症的病人也减少。相反,一些其它疾病例如慢性肾衰和神经性厌食血浆脂联素水平增加。血浆脂联素与血糖、胰岛素、甘油三酯水平和体重指数负相关,与高密度脂蛋白胆固醇水平和胰岛素刺激的葡萄糖利用正相关。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人脂联素的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 人脂联素试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人脂联素抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的鼠抗人脂联素检测抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品脂联素夹在捕获抗体和检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。脂联素的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人脂联素的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: 人脂联素试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人脂联素抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的鼠抗人脂联素检测抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品脂联素夹在捕获抗体和检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。脂联素的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450nm处测定吸光值进行定量。
在胚胎发育的过程中,干细胞可以分化形成所有的胚胎组织。在成人有机体,干细胞和祖细胞作为身体的修复系统,重新补充专业细胞,以维持再生器官正常转交,例如血液、皮肤或者小肠组织。 最近研究提出干细胞的维护和分化是由microRNAs (miRNA)调控的。miRNA是一段小的非编码RNA分子(大约20个核苷酸长),对基因的表达调控和细胞分化起着重要的作用。研究发现干细胞的正常维持和分化是受到miRNA严格调控的。在干细胞中,miRNA的表达水平也不一样。例如,在神经线性分化的过程中,脑组织特异性的miR-124a和miR-9的表达差别很大。据报导miRNA也调控癌症干细胞。干细胞miRNA芯片是专门检测干细胞维持和分化相关的47种miRNA表达水平,可以用于人源,小鼠,以及大鼠的样品。对干细胞miRNA表达的研究可以帮助了解干细胞的调控机制。 A.优点: 美国Signosis干细胞相关的miRNA微孔板阵列试剂是一种直接杂交总RNA的一种方法,具有下列优点: ·操作简单---检测48种miRNA的表达如ELISA试验一样简单,无需用酶转换miRNA成cDNA,检测步骤只是孵育和洗涤。 ·灵敏度高---较miRNA Northern blotting分析敏感100倍。 ·分辨力强---在分辨同源miRNA 时,较Northern blot有更高的分辨力。 ·差别定量---二个或更多标本miRNA表达的差异可定量分析。 B.原理: 美国Signosis的miRNA直接杂微孔板交阵列方法是简单的二步法。板杂交和链霉亲和素-辣根酶检测。微孔板包被上oligo mix,其包括一对oligo—与特定靶miRNA并列杂交的相应oligo、通用捕获oligo和生物素标记oligo。该方法中,总RNA直接用于杂交。当RNA中存在靶miRNA时,其做为桥将生物素标记的oligo与捕获oligo连接起来,这样可以通过链霉亲和素辣根酶结合物以及化学发光底物检测。如果不存在靶miRNA时,生物素标记的探针就被冲洗掉,因此无检测信号。在微孔板阵列中,48个孔包被上不同的oligo mix来检测不同的miRNA,96孔板可定量测定和比较二个样品中48种miRNA,U6用于标化。
转化生长因子β1 (TGF-ß1)基因编码的一种多功能细胞因子,调控许多细胞的增殖、分化和其它功能,细胞包括周围的基质细胞,免疫细胞,内皮细胞和平滑肌细胞。TGF-ß1引起免疫抑制和血管形成。通常以炎症(免疫)反应攻击症的效应T细胞,TGF-ß将其转换成调节(抑制) T细胞而关闭炎症反应。TGF- β导致许多类型的细胞凋亡。TGF-β可作用于脂肪前体细胞。TGF- ß1证明是成脂肪细胞系分化的一种强抑制剂。另外,分化缺陷、来自于成脂肪细胞系1246的胰岛素非依赖性系源细胞在条件培养基上产生TGF- ß1样的多肽,以一种自分泌的方式调节细胞分化能力。TGF-b1表达的增加与体重指数和疾病所致肥胖的腹部脂肪组织有关。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人TGF-ß1的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: TGF-ß1试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人TGF-ß1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的鸡抗人TGF-ß1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品TGF-ß1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。TGF-ß1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。 A. 优点: · 性价比高——高质量,低价格 · 高效灵活——多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量 · 特异性强——优选高度特异的针对人TGF-ß1的配对抗体 · 操作简单——96孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理: TGF-ß1试剂为固相酶免法。方法采用鼠抗人TGF-ß1抗体做为微孔板的固相捕获抗体,生物素标记的鸡抗人TGF-ß1抗体做检测抗体以及辣根过氧化物酶(HRP)标记的链酶亲和素进行检测,待测样品TGF-ß1夹在捕获抗体和标记检测抗体之间与二者反应,随后与链酶亲和素酶结合物反应。孵育后,洗去未结合的检测抗体及随后的酶结合物。加入TMB底物,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。TGF-ß1的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
人ß2-微球蛋白(ß2-MG)是由99个氨基酸的单一多肽链组成的低分子量蛋白(MW 11600) ,与HLA-A,- B和- C主要组织相容性复合抗原的小链相同, 主要存在于白细胞表面。 白细胞生成增加或破坏增加可造成血液ß2-MG水平增加。ß2-MG通常由肾脏肾小球从血液滤出,到达肾脏的肾小管时,部分被再吸收回到血液。在肾小球肾病,肾小球不能将其滤出血液,因此血液中的水平增加尿液中的水平减少。 在肾小管肾病,肾小管不能将其再吸收回血液,因此尿液中的水平增加,血液中的水平减少。美国 Signosis ß2-MG 酶免试剂为人血清ß2-MG的定量测定提供一个快速、敏感和可靠的分析方法,试剂盒测定范围为0.625--10 μg/ml,并可测定ß2-MG最小的可检测浓度。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格。 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对ß2-MG的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B.原理: ß2-MG试剂为固相酶免法。 方法采用抗ß2-MG单克隆抗体做为微孔板的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗ß2-MG抗体做检测抗体, 待测样品同时与捕获抗体和标记抗体反应后,ß2-MG夹在二者之间。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入TMB底物,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。ß2-MG的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
肥胖症增加代谢综合症、高血压、动脉粥样硬化和血栓形成的风险。 许多蛋白被认为是肥胖与代谢综合症和心血管疾病发展的相关蛋白,这些蛋白的血浓度一般用ELISA检测。为检测这些蛋白的作用,美国Signosis开发出复合酶免法平行检测试剂同时测定8种蛋白质的血浆浓度,这8种蛋白是肿瘤坏死因子—a,白介素-6,干扰素-r,白介素-1a,白介素-1b,单核细胞趋化蛋白-1,血管生成因子和瘦素。二个样品之间蛋白质的区别可以通过数据比较加以测定,因此有助于发现不同样本中这些蛋白的变化。 A. 优点: · 多种复合---单一板条可同时测定8种肥胖症生物标记物 · 灵活弹性---单一板块可比较2个样品到12个样品 · 差别定量---不同于膜芯片方法,样品中各个蛋白的区别可以定量比较。另外, EA-1222为做标准曲线提供标准品。 · 勿需贵重仪器---不同于珠式的检测方法,勿需贵重仪器 · 操作简单---12x 8孔预包被板的完整试剂系统 B. 原理 板条每个孔包被有针对肥胖症生物标记蛋白的特异抗体,8个孔包被有8不同抗体,一个板条8个孔可测定8不同蛋白质。待测样品可同时与二个抗体组成的抗体对反应,肥胖症生物标记蛋白夹在固相抗体和酶标记抗体中间。 孵育后,洗涤板孔除去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应,加入终止液后转成黄色。 肥胖症生物标记蛋白的浓度与待测样品颜色深浅成正比。 450 nm处测定吸光值进行定量。
细胞因子是信号分子,在细胞生长、分化、基因表达、迁移、免疫和炎症的许多生物过程中发挥重要的作用。细胞因子由细胞分泌,与细胞表面受体结合,激活细胞信号传导通路,传递细胞间的讯息。细胞因子的功能异常导致许多疾病,如关节炎、急慢性肝病、肠炎、心脏相关疾病。许多细胞因子常常涉及一种生物学或疾病过程。因此全面分析多种细胞因子的表达可以有效揭示疾病的潜在机制。人细胞因子微孔板阵列试剂以高通量的方式同时监测31种人类细胞因子,该方法快速敏感的同时定量检测不同样本多种细胞因子的水平。 (详见:http://www.zhongzhibio.com/kysj/423.htm) A. 优点: · 多重复合—— 一次ELISA试验可同时测定3份样品的31种细胞因子 · 敏感性高——只需少量样本 · 勿需贵重仪器——与珠式方法不同,不需要贵重仪器 · 操作简单—— 试剂盒包括预包被板等所有组分 B. 原理: 96孔白板分成3个区,每个区有4列,每个区31种特异的细胞因子捕获抗体分别包被在31个孔,1孔未包被任何抗体用作空白对照。样品如细胞培养悬液、细胞裂解液、组织匀浆、血清或血浆样品与微孔板温育,捕获的细胞因子蛋白用混合的生物素化抗体同时检测,待测样本与捕获抗体和检测抗体结合温育后,洗涤除去未接合的标记抗体,加入酶及TMB底物,产生蓝色变化,加入终止液变成黄色,细胞因子的浓度与呈色的强度成正比,测定450nm的吸光度值。 A. 优点: · 多重复合—— 一次ELISA试验可同时测定3份样品的31种细胞因子 · 敏感性高——只需少量样本 · 勿需贵重仪器——与珠式方法不同,不需要贵重仪器 · 操作简单—— 试剂盒包括预包被板等所有组分 B. 原理: 96孔白板分成3个区,每个区有4列,每个区31种特异的细胞因子捕获抗体分别包被在31个孔,1孔未包被任何抗体用作空白对照。样品如细胞培养悬液、细胞裂解液、组织匀浆、血清或血浆样品与微孔板温育,捕获的细胞因子蛋白用混合的生物素化抗体同时检测,待测样本与捕获抗体和检测抗体结合温育后,洗涤除去未接合的标记抗体,加入酶及TMB底物,产生蓝色变化,加入终止液变成黄色,细胞因子的浓度与呈色的强度成正比,测定450nm的吸光度值。
检测基因表达常常需要有许多步骤,RNA制备、反转录和PCR。为简化基因表达分析,美国Signosis研发了一种多生物素信号放大技术(MBSA),基于这项技术,基因表达可以直接用细胞裂解物测定而无需RNA制备、反转录和PCR。美国Signosis已经研发了定量测定TNF和IL-6检测试剂,现在可以提供定量测定各种基因mRNA微孔板检测的定制服务,只需客户提供基因信息如基因的ID,即可提供完整的检测试剂。 A. 优点: 美国Signosis mRNA微孔板定量检测试剂具有下列优势 · 准确定量---mRNA用体外的RNA做参照,进行定量测定。 · 灵敏度高---在较宽的动力学范围内可测定少至500个分子。 · 操作简单---细胞裂解物或总RNA可直接用于板杂交,其无需总RNA制备和mRNA到cDNA的酶促转换, 整个检测步骤主要是“孵育和洗涤”。 B. 原理: 在MBSA中,多生物素加到聚合物上,其含有标识的互补序列,可以与连接序列结合。连接序列含有靶序列和标识序列。一条连接序列具有共同的标识序列,但带有不同的靶序列以与靶基因不同区域杂交。因此具有二个层级的放大:多个区域和多个生物素。RNA微孔板检测结合MBSA,靶mRNA通过多个捕获oligo捕获在微孔板上,捕获的RNA分子与多个连接分子杂交,靶定mRNA不同区域,MBSA随后与连接分子杂交,捕获的生物素分子用链霉亲和素酶结合物及发光底物检测。
髓过氧化物酶 (MPO)是白细胞活化时由嗜中性粒细胞和单核细胞的颗粒释放的,在宿主防御系统和炎症情况下起重要作用。 炎症与急性冠脉综合症的不良后果有关。髓过氧化物酶是一种丰富的白细胞的酶,在由于心脏原因而突然死亡的撕裂性损伤患者中增高。 增高的MPO水平与冠脉疾病相关。 在动脉粥样硬化,动脉壁硬化, 动脉粥样化区域可找到高浓度的MPO及其氧化产物 。 MPO与脆弱的斑块和内皮细胞的功能不良有关。 在胸痛住院的患者,高血清和血浆MPO水平表明高风险的心血管事件。 低CRP和TnT水平,高MPO水平的病人比有低CRP、TnT和MPO水平的病人具有更大的心脏病风险。 心肌受损之前高水平的MPO以及水平不断增加表明不稳定的斑块形成,因此MPO水平是潜在心脏病事件良好的预报因子。 A. 优点: · 性价比高---高质量,低价格 · 高效灵活---多个样品可同时分析,灵活确定分析试样的数量。 · 特异性强---优选高度特异的针对MPO的配对抗体。 · 操作简单---96孔预包被板的完整试剂系统 B. 技术原理 MPO 试剂为固相酶免法。 方法采用针对MPO不同抗原决定簇的鼠单克隆抗体做为微孔板中的固相捕获抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的鼠抗MPO单克抗体做检测抗体, 待测样品中的MPO可同时与捕获抗体和标记抗体反应。孵育后,洗去未结合的标记抗体。 加入HRP底物TMB,产生蓝色反应, 加入终止液后转成黄色。 MPO的浓度与待测样品的颜色深浅呈正比,450 nm处测定吸光值进行定量。
Akt是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在介导多种细胞活动的信号中发挥重要作用,这些细胞活动包括细胞生长、分化、细胞周期、转录和糖代谢。该酶由PI3K激活,激活的Akt3可引发广泛的蛋白底物磷酸化,如GSK-3、IKK-ß、BAD、MDM2、mTOR、CASP9、p21Cip1、p27Kip1。Akt底物的差异表达有不同的表型结果。美国Signosis公司的Akt通路-调控的cDNA微孔板阵列检测试剂为检测这些基因的表达提供了一种简单的方法。 A. 优点: 美国Signosis公司基于其自有的cDNA微孔板阵列专利技术研发的人AKT通路cDNA微孔板阵列检测试剂具有以下优点: ·操作简单---做基因表达试验像做ELISA酶免试验一样简单。 ·灵敏度高---检测的mRNA分子转换成多个生物素标记的cDNA进行敏感检测。 ·定量对比---二个或以上样品基因表达的差异可定量分析。 B. 原理: 美国Signosis 公司自有的cDNA微孔板阵列专利检测技术是基于微孔板杂交的检测方法,该方法是将mRNA反转录成cDNA来检测多种基因的表达。与芯片分析方法相似,加入生物素-dUTP后,总RNA先转录成生物素标记的cDNA。通过预包被在微孔板上的特异的寡核酸,将靶基因捕获到微孔板上(而不是膜上)。捕获的cDNA进一步通过链酶亲和素辣根酶(HRP)检测。加入HRP发光底物,cDNA的浓度与待测标本的发光强度成正比。
转录因子(TF)是一组控制基因表达的细胞蛋白。TF一旦被激活,就与启动子区的顺式作用元件结合,参与靶基因的表达。凝胶迁移试验(EMSA)是一种常用的体外监测TF激活的方法。基于知名文献选出转录因子一致性序列,将其做为检测人、小鼠、大鼠TF活性的探针。美国Signisis的每种EMSA试剂盒是一种即用试剂,包括了所有试剂和转印的膜。 A. 优点: 美国Signosis 公司凝胶迁移试验试剂,具有下列优势: · 勿需同位素---基于化学发光检测 · 勿需制备探针---已制备好生物素预标记的探针 · 步骤简单---方法简单、流畅 B. 原理 TF激活时,与生物素标记的探针结合,探针是根据TF结合的一致性序列进行设计。形成的复合物进行电泳,将比游离探针跑得慢,因此可以很容易辨别。二个或更多样本可通过迁移试验比较,其差异可根据迁移条带的密度加以确定。